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目的:前B细胞克隆增强因子(PBEF)作为一种在细胞内广泛表达的酶,其表达变化与急性肺损伤(ALI)的有关。在体外细胞实验中构建肺泡上皮细胞与肺血管内皮细胞的缺复氧模型,证明其是通过增加了肺血管上皮细胞的通透性,以及抑制了肺泡上皮细胞的钠水转运系统,在这两方面因素下导致了肺水肿液的增加。钠水转运系统作为肺水肿液清除的中心环节,在大鼠体外循环(CPB)模型中PBEF与其的关系及作用机制目前尚未明确。因此本研究采用腺病毒干扰大鼠PBEF的表达,在此基础上构建体外循环模型,并研究PBEF与CPB后钠水转运系统的关系以及作用机制。方法:(1)随机取SD大鼠分为以下6组并进行对应处理,A组(空白组,常规麻醉,不行任何处理),B组(手术组,深低温辅助体外循环30min),C组(肺损伤组,尾静脉注射LPS构建肺损伤模型),D组(腺病毒干扰+肺损伤组,提前1周注射腺病毒-PBEF-shRNA载体,余操作同C组),E组(腺病毒干扰空载+手术组,提前1周注射腺病毒-空白shRNA载体,余操作同B组),F组(腺病毒干扰+手术组,提前1周注射腺病毒-PBEF-shRNA载体,余操作同B组)。(2)测定肺组织湿干重比、细胞NKA酶水解活性、肺组织病理学改变、免疫组化检测PBEF的表达以及定位表达情况。(3)取肺组织进行Western blot及PCR法检测肺组织中PBEF与钠水通道相关蛋白(ENaC、AQP1、AQP5)及肺表面活性物质(SP)的表达情况。(4)检测磷酸化P38MAPK、ERK1/2、Akt的表达变化。结果:(1)与传统的尾静脉注射LPS构建的肺损伤模型相比,大鼠行CPB后也会造成一定程度的肺损伤,在两种肺损伤模型中PBEF均出现高表达。(2)CPB肺损伤模型中,磷酸化MAPK、ERK1/2、Akt表达升高,钠水转运系统相关蛋白表达升高。(3)在CPB大鼠模型种干扰PBEF表达后,磷酸化MAPK、ERK1/2、Akt表达下降;ENaC的蛋白质与mRNA表达升高,AQP1的蛋白质表达下降,AQP5的蛋白质与mRNA表达下降。(4)在CPB大鼠模型种干扰PBEF表达后,NKA酶水解活性增强,肺组织干湿重比降低。结论:(1)PBEF是体外循环术后肺损伤的标记蛋白。(2)PBEF可通过MAPK、ERK1/2、Akt的磷酸化共同调控钠水转运系统相关因子的表达。(3)抑制PBEF表达后可提高ENaC和NKA活性并减轻体外循环术后的肺水肿。