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肿瘤的化疗药物治疗具有很长的历史,但治疗的过程中大多数的药物副作用大。靶向制剂的研究对肿瘤化疗药物的应用具有非常重要的意义。在靶向制剂的研究中,辅料的研究是重要的一个方面,肿瘤靶向辅料成为国际上靶向制剂研究的热点和难点。 有报道β-环糊精硫酸酯具有对肿瘤新生血管的选择性,在药剂学的研究中β-环糊精作为药物包合物载体,应用于许多的研究和新药中,它所形成的是一种分子胶囊,在药剂学中具有广泛的用途。作为β-环糊精的衍生物,β-环糊精硫酸酯同样具有环状中空园筒性结构,使其可以作为载体包裹药物。这样β-环糊精硫酸酯既具有对新生血管的选择性又具有药物包合物载体的作用。 本课题采用三氧化硫吡啶络合物和吡啶盐置换的方法合成了β-环糊精硫酸酯。红外光红外吸收光谱表明硫酸酯化β-环糊精相对于β-环糊精新增加的红外吸收峰为 2099cm-1,1644cm-1,无吸收峰消失。从硫酸酯化β-环糊精的核磁共振图谱上可以看出在3.8~4.37ppm区域包含除端基质子H-1外葡萄糖上所有质子的信号,4.5~5.6 区域则为端基质子 H-1 信号。电喷雾质谱法表明硫酸酯化β-环糊精电喷雾质谱图中出现了 7 个主要信号,mz 分别为 1810.94,1577.54,1426.92,1354.96,1304.03,1252.94 和 1202.06,主峰附近的峰为同位素峰。其中 1354.96和 1252.94 之间,1304. 03 和 1202.06 之间质荷比 mz 均相差 102,是-SO2Na 替代 H 的质量,由质荷比 mz 分布情况可将这些峰归属为含-SO2Na 基团的硫酸酯化β-环糊精。元素分析表明分子中各元素含量为:C:18.45%;H:3.45%;S:15.55%,。以上说明合成产物为 14 个硫酸根所取代的β-环糊精硫酸酯。 本课题对合成的β-环糊精硫酸酯进行了初步的毒理学研究,小白鼠急性毒性试验表明,小白鼠经口服给药 LD50>10000mg/kg,属无毒级。大鼠 30 天喂养试验表明各组大鼠均未见异常症状和体征,也无死亡;各实验组大鼠的进食量、体重增加、食物利用率、血液学、血清蛋白、脏体重及脏重/体重均无显著性差异(P>0.05)、病理解剖结果表明各剂量组与对照组比较均无异常,说明本品对心、肝、肺、脾、肾、生殖器官均无影响。 本课题进行了β-环糊精硫酸酯对常规抗肿瘤药物 5-氟尿嘧啶(5-Fu)和甲 1<WP=7>氨蝶呤的包合作用研究,采用三因素三水平正交设计实验,考察了包合工艺对包合物中药物溶解的影响,通过对 5-Fu 和甲氨蝶呤的包合作用研究可知,β-环糊精硫酸酯可以成功地包裹一般的小分子化疗药物。差热分析显示两种药物包裹后其药物特征峰均消失,显示形成了新的物相——包合物。正交实验研究表明,增加药物的溶解度主要是β-环糊精硫酸酯的浓度,随着β-环糊精硫酸酯的浓度的增加,药物的溶解度也增加。其次包裹的时间和包合的温度也对包合物的形成有一定的影响。通过包合物溶解度曲线研究表明,随着β-环糊精硫酸酯的浓度的增加,包合物中药物的溶解度也随着增加,并且呈线性关系,50%(W/V)β-环糊精硫酸酯溶液中,包合后 5-Fu 在水中的溶解度增大 12.6 倍,甲氨蝶呤在水中增大 121.2 倍。本研究测得 5-Fu K 值为 17.14。甲氨蝶呤 K 值为 404.5,表明所形成的包合物稳定。 本课题建立了 HPLC 法测定大鼠肝脏组织中 5-Fu 的方法,色谱条件:流动相:甲醇—水(体积比 3:97,冰醋酸调 pH=3.5)。UV 检测波长为 270nm,流速0.5ml/min;进样体积:20μl,外标法定量。结果表明本方法在测定大鼠肝脏组织中 5-Fu 浓度时,组织中的杂质不干扰测定。本方法线性关系良好(r=0.9997),回收率较高(>96%),精密度(RSD<5%)也能满足测定要求,且简便、快捷。 本课题成功地建立了二甲基亚硝胺诱发大鼠肝癌动物模型,从病理切片和CT 扫描可以看出肿瘤生长明显。给药组生化指标 A/G、ALT、AST、γ-GT、ALP 和 BIL 对照组比较升高,且有显著性差异(P<0.01);ALB、PT 未见明显变化。 本课题进行了荷瘤大鼠肝脏局部给药后 5-氟尿嘧啶在肝脏正常组织和肿瘤组织中分布研究,结果表明给予 5-氟尿嘧啶的大鼠,其在肝脏正常组织的 5-氟尿嘧啶浓度为(472.1±58.9)μg/g,肿瘤组织中的含量为(443.9±62.6)μg/g,通过等样本方差 t 检验正常组织和肿瘤组织中的含量没有显著性差异(p>0.05),而给予包合物的大鼠,其在肝脏正常组织的 5-氟尿嘧啶浓度为(342.8±60.2)μg/g,肿瘤组织中的含量为(632.6±62.7)μg/g,通过等样本方差 t 检验正常组织和肿瘤组织中的含量有显著性差异(p<0.01)。 本课题进行了荷瘤大鼠肝脏尾静脉给药后 5-氟尿嘧啶肝脏中分布研究,结果表明给与 5-氟尿嘧啶注射剂的大鼠在肝脏中 10min 、30min、60min、120min、 2<WP=8>240min 时浓度分别为(36.2±3.6)μg/g、(25.1±4.4)μg/g、(12.8±2.5)μg/g、(4.8±1.3)μg/g、(1.1±0.44)μg/g。而给与 5-氟尿嘧啶-β-环糊精硫酸酯包合物的大鼠在肝脏中 10min 、30min、60min、120min、240min 时浓度分别为(58.9±8.5)μg/g、(46.4±5.0)μg/g、(29.5±5.9)μg/g、(20.2±3.9)μg/g、(10.7±2.3)μg/g。两种给药方法比较