目的:⑴利用荧光金(FluoroGold, FG)经颅逆行标记大鼠视网膜神经节细胞(retinal ganglions, RGCs),观察视神经不同夹伤时间,伤后不同时期RGCs密度的变化情况。⑵观察大鼠外伤性视神经损伤后,脑脊液中注射睫状神经营养因子(ciliary neurotrophic factor,CNTF)是否对RGCs有保护作用,是否有剂量依从性。方法:(1)采用反向镊夹持视神经的方法建立外伤性视神经损伤模型,按夹伤时间不同分为对照组和夹伤5秒组、夹伤10秒组、夹伤20秒组,分别于伤后第7、14、21天获取视网膜,观察不同夹伤时间,伤后不同时期RGCs密度的变化情况。(2)建立大鼠视神经5秒夹伤模型,分为三组,包括不同剂量的药物组和对照组,药物组大鼠脑脊液中分别给予CNTF100μg、150μg,对照组脑脊液中给予注射用水,分别于伤后第7、14天获取视网膜,利用FG标记RGCs的方法,观察损伤后各组RGCs密度有无变化及变化情况;光镜、电镜观察视神经轴突面积或轴突有无变化及变化情况。(3)SPSS11.0进行统计分析。结果:(1)引起各实验组RGCs密度发生显著变化的因素为致伤时间(P<0.01)和伤后时间(P<0.01),致伤时间越长,RGCs密度减少越明显;伤后时间越长,RGCs密度减少越明显;各实验组伤后第7至第14天RGCs密度减少明显,伤后第14至第21天RGCs密度减少趋于平稳。(2)损伤后第7天、14天,脑脊液内是否注射CNTF对RGCs的存活有统计学意义(P<0.05),药物组RGCs密度较对照组高,但不同剂量CNTF组之间RGCs密度差异不显著(P>0.05);光镜下观察,CNTF组视神经轴突面积占视神经横截面积百分比明显高于对照组(P<0.01),不同剂量CNTF组之间视神经轴突面积占视神经面积百分比差异显著(P<0.01);电镜下观察,伤后不同时期,CNTF组均较对照组视神经轴突排列整齐,轴浆均匀,无髓鞘松解及轴膜脱离改变,轴突内微管、微丝明显增多。结论:(1)视神经损伤后,RGCs的存活数量与视神经损伤时间和伤后时间这两个因素关系密切。(2)视神经损伤后,脑脊液内注射CNTF对RGCs有一定保护作用,但一次给药仅能在伤后第7天发挥最佳的保护作用,是否有剂量依从性仍有待于研究。