酪氨酸磷酸化信号转导网络是由酪氨酸磷酸化蛋白质及其相结合的蛋白质形成的复合物进而形成多级级联而组成的。该信号转导网络系统参与多种重要的细胞生物学功能,如增殖、分化、凋亡、迁移和细胞极性等。该信号转导网络系统功能紊乱必将引起多种疾病,例如肿瘤和糖尿病等。近二十多年来,尽管各单一线性酪氨酸磷酸化信号转导通路已经得到很好的研究,但整体的网络系统调节机理研究进展极端缓慢,了解甚少。主要的研究障碍在于人们对多条通路的调节结点和对话点分子组成以及调节机理缺乏认识;从根本上说是在于研究手段上缺乏特别行之有效的技术和方法。为了更好的了解该网络系统在细胞内的生物学功能及其分子调节机理,发现并研究新的重要调节结点和对话点,本研究采用磷酸化蛋白质组学的技术方法,结合信号转导研究的策略,成功的建立和完善了高水平的酪氨酸磷酸化信号蛋白质组的平台技术,在细胞水平上对酪氨酸磷酸化蛋白及其结合蛋白进行了大规模的分析鉴定,发现了一批新的酪氨酸磷酸化的蛋白和结合蛋白,建立了酪氨酸磷酸化蛋白肽段库。此外,又发现了三个具有重要生物学功能的蛋白Par3、CASK和PHF14全新的生物学功能,阐明了Par3酪氨酸磷酸化依赖性的上皮细胞极性形成的调控机制;克隆了新基因PHF14,明确了其可能参与细胞周期进程的调控;初步表明CASK对胰岛素诱导的基因表达及葡萄糖摄取的调控。我们的研究结果为酪氨酸磷酸化蛋白信号转导网络调控上皮细胞极性建立、参与细胞周期调控以及葡萄糖的摄取增添了新的结合点和新的调节通路,为信号网络分子调控机理展示了新的方向,为更好理解酪氨酸磷酸化信号网络调控细胞生物学功能增添了新的内容。我的工作由两个大部分组成,第一部分为磷酸化酪氨酸信号的蛋白质组学分析(第一章),第二部分为三个具有重要生物学功能的蛋白Par3、PHF14和CASK全新的生物学功能的探讨。为了更好的阐明内容,第二部分分为三个方面,分别为酪氨酸磷酸化的Par3调控了EGFR信号通路促进的上皮细胞紧密连接的形成(第二章),一个新的PHD锌指结构域蛋白质-PHF14调控了细胞周期的进展(第三章)以及CASK调控了胰岛素诱导的基因的表达及葡萄糖的摄取(第四章)。