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目的:探究阿托伐他汀在急性脑梗死治疗中的作用。
方法:将体重符合要求且健康的SD大鼠分成假手术组，生理盐水(NS)组和实验组(阿托伐他汀组)。提前每天使用阿托伐他汀20mg/kg的剂量给予假手术组及实验组进行灌胃用药,给对照组(NS组)相同的生理盐水进行灌胃。时间为一个月,除假手术组外,均行线拴法行大脑中动脉栓塞术。栓塞3小时后观察大鼠的梗死情况,根据其神经功能评分,选择合适的大鼠进行灌注取脑,然后提取梗死区脑组织进行免疫组化,随后观察急性脑梗死前后脑组织内MMP-9和TIMP-1的表达情况;通过Westernblot检测梗死区域脑组织标本匀浆中MMP-9和TIMP-1的表达量及MMP-9/TIMP-1的比值变化,TTC染色法探究服用阿托伐他汀后脑梗死面积的变化。使用qPCR检测梗死区域脑组织标本匀浆中MMP-9和TIMP-1的mRNA的变化量。并对每个组的大鼠进行神经功能评分,探究神经功能的变化。
结果:1.急性脑梗死时MMP-9表达量明显增加,TIMP-1的表达量也相应增加,我们取正常脑组织及急性脑梗后的脑组织行免疫组化,通过免疫组化我们能够观察到MMP-9和TIMP-1的表达量相对于正常机体中较高。2.阿托伐他汀能够抑制MMP-9的表达,同时也降低了TIMP-1的表达,进一步研究,发现阿托伐他汀能够降低MMP-9/TIMP-1的比值。在急性脑梗死后,取梗死组织进行WesternBlot,研究表明Atorvastatin组中的MMP-9的表达明显低于NS组(P＜0.01,n=4,ttest)。Atorvastatin组中的TIMP-1的表达相对于NS组也明显降低(P＜0.01,n=4,ttest)。TIMP-1是MMP-9的抑制剂,两者之间存在着相互作用,现两者的表达都降低,因此我们进一步分析,进行MMP-9/TIMP-1的比值探究,分析MMP-9和TIMP-1平衡状态,看是否达到一个新的平衡,在比较MMP-9/TIMP-1的比值中,我们发现Atorvastatin组中MMP-9/TIMP-1比值相对于NS中明显要低(P＜0.01,n=4,ttest)。然后我们再使用qPCR,分析TIMP-1和MMP-9这两个蛋白的mRNA的表达情况,我们可以看到在急性脑梗死后,Atorvastatin+ACI组的MMP-9的mRNA的表达相对于NS+ACI组明显较少(P＜0.05),提示阿托伐他汀对MMP-9的mRNA表达具有抑制作用,同时Atorvastatin+ACI组的TIMP-1的mRNA的表达相对于NS+ACI组也明显较少(P＜0。05),提示了阿托伐他汀对TIMP-1也具有抑制作用。3.提取大鼠模型脑组织,并使用TTC染色法,并进行数据分析,从中我们能够清楚的看到Atorvastatin组的脑梗死面积明显要小于NS组中的脑梗死面积(P＜0.01)。并且对两组大鼠进行神经功能评分,我们能够明显的看出Atorvastatin组神经功能保护明显要优于NS组。阿托伐他汀能够通过调节MMP-9和TIMP-1的表达,抑制MMP-9的表达,降低MMP-9/TIMP-1的比值,根据TTC染色结构及神经功能评定情况,我们可以看到阿托伐他汀的使用能够减少脑梗死的梗死面积,提高神经功能的保护,改善预后。
结论:我们的实验证实MMP-9在急性脑梗死时表达会明显增加,而使用阿托伐他汀组别的大鼠在急性脑梗死后会出现MMP-9及TIMP-1的表达降低,进一步分析发现使用阿托伐他汀的大鼠组较对照组的MMP-9/TIMP-1的比值要小很多,阿托伐他汀组的急性脑梗死梗死面积也较对照组要明显减少,因此我们得出阿托伐他汀的使用可以保护神经功能,减少梗死面积,有助于改善预后状况。同时根据MMP-9/TIMP-1的比值的变化,我们可以探究其比值变化对急性脑梗死预后的关系,针对次现象,又为我们治疗提出一个新的方向。
方法:将体重符合要求且健康的SD大鼠分成假手术组，生理盐水(NS)组和实验组(阿托伐他汀组)。提前每天使用阿托伐他汀20mg/kg的剂量给予假手术组及实验组进行灌胃用药,给对照组(NS组)相同的生理盐水进行灌胃。时间为一个月,除假手术组外,均行线拴法行大脑中动脉栓塞术。栓塞3小时后观察大鼠的梗死情况,根据其神经功能评分,选择合适的大鼠进行灌注取脑,然后提取梗死区脑组织进行免疫组化,随后观察急性脑梗死前后脑组织内MMP-9和TIMP-1的表达情况;通过Westernblot检测梗死区域脑组织标本匀浆中MMP-9和TIMP-1的表达量及MMP-9/TIMP-1的比值变化,TTC染色法探究服用阿托伐他汀后脑梗死面积的变化。使用qPCR检测梗死区域脑组织标本匀浆中MMP-9和TIMP-1的mRNA的变化量。并对每个组的大鼠进行神经功能评分,探究神经功能的变化。
结果:1.急性脑梗死时MMP-9表达量明显增加,TIMP-1的表达量也相应增加,我们取正常脑组织及急性脑梗后的脑组织行免疫组化,通过免疫组化我们能够观察到MMP-9和TIMP-1的表达量相对于正常机体中较高。2.阿托伐他汀能够抑制MMP-9的表达,同时也降低了TIMP-1的表达,进一步研究,发现阿托伐他汀能够降低MMP-9/TIMP-1的比值。在急性脑梗死后,取梗死组织进行WesternBlot,研究表明Atorvastatin组中的MMP-9的表达明显低于NS组(P＜0.01,n=4,ttest)。Atorvastatin组中的TIMP-1的表达相对于NS组也明显降低(P＜0.01,n=4,ttest)。TIMP-1是MMP-9的抑制剂,两者之间存在着相互作用,现两者的表达都降低,因此我们进一步分析,进行MMP-9/TIMP-1的比值探究,分析MMP-9和TIMP-1平衡状态,看是否达到一个新的平衡,在比较MMP-9/TIMP-1的比值中,我们发现Atorvastatin组中MMP-9/TIMP-1比值相对于NS中明显要低(P＜0.01,n=4,ttest)。然后我们再使用qPCR,分析TIMP-1和MMP-9这两个蛋白的mRNA的表达情况,我们可以看到在急性脑梗死后,Atorvastatin+ACI组的MMP-9的mRNA的表达相对于NS+ACI组明显较少(P＜0.05),提示阿托伐他汀对MMP-9的mRNA表达具有抑制作用,同时Atorvastatin+ACI组的TIMP-1的mRNA的表达相对于NS+ACI组也明显较少(P＜0。05),提示了阿托伐他汀对TIMP-1也具有抑制作用。3.提取大鼠模型脑组织,并使用TTC染色法,并进行数据分析,从中我们能够清楚的看到Atorvastatin组的脑梗死面积明显要小于NS组中的脑梗死面积(P＜0.01)。并且对两组大鼠进行神经功能评分,我们能够明显的看出Atorvastatin组神经功能保护明显要优于NS组。阿托伐他汀能够通过调节MMP-9和TIMP-1的表达,抑制MMP-9的表达,降低MMP-9/TIMP-1的比值,根据TTC染色结构及神经功能评定情况,我们可以看到阿托伐他汀的使用能够减少脑梗死的梗死面积,提高神经功能的保护,改善预后。
结论:我们的实验证实MMP-9在急性脑梗死时表达会明显增加,而使用阿托伐他汀组别的大鼠在急性脑梗死后会出现MMP-9及TIMP-1的表达降低,进一步分析发现使用阿托伐他汀的大鼠组较对照组的MMP-9/TIMP-1的比值要小很多,阿托伐他汀组的急性脑梗死梗死面积也较对照组要明显减少,因此我们得出阿托伐他汀的使用可以保护神经功能,减少梗死面积,有助于改善预后状况。同时根据MMP-9/TIMP-1的比值的变化,我们可以探究其比值变化对急性脑梗死预后的关系,针对次现象,又为我们治疗提出一个新的方向。