【摘 要】
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目的：含转录激活因子样效应物核酸酶（Transcription activator-like effectorsnucleases，TALENs）左臂TALEN F16.5与右臂TALEN R18.5的重组穿梭质粒pDC316联合作用对趋化因子受体5
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目的：含转录激活因子样效应物核酸酶（Transcription activator-like effectorsnucleases，TALENs）左臂TALEN F16.5与右臂TALEN R18.5的重组穿梭质粒pDC316联合作用对趋化因子受体5（chemokine receptor type5，CCR5）进行基因编辑，通过碱基变化使CCR5结构发生改变，从而证实TALENs具有基因定向编辑的作用。方法:构建表达TALENs的重组载体。将Jurkat和Hela细胞分为四组：第一组：重组TALEN F16.5穿梭质粒/重组TALEN R18.5穿梭质粒/CVU55762（FRC组）组；第二组：重组TALEN F16.5穿梭质粒/CVU55762组（FC组）;第三组：blank（CVU55762）组；第四组：荧光蛋白对照组GFP组。对Hela细胞株转染对CCR5基因具有表达编辑功能的TALENs的含TALEN F16.5与TALEN R18.5重组质粒和有荧光蛋白的质粒CVU55762，首先通过观察荧光情况初步确定转染效率以及基因编辑效率，然后采用荧光显微镜观察转染情况并对Hela细胞基因组CCR5片段测序。结果:荧光效率显示表达转录激活因子样效应物核酸酶TALEN F16.5与TALENR18.5的重组穿梭质粒pDC316同时作用CCR5能显著破坏其碱基序列；第一组转染细胞荧光效率较高；第一组细胞株较其他三组细胞株的CCR5序列出现碱基异常（增加或减少碱基）水平相对较高。结论：1、构建了表达TALENs的重组质粒pDC316。2、含表达TALEN F16.5与TALEN F18.5的重组质粒pDC316转染入Hela细胞可编辑CCR5基因片段。
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