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类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种器官特异性的自身免疫病,病变主要累及全身大小关节,表现为关节腔滑膜炎症、渗液、细胞增殖、肉芽肿形成,软骨及骨破坏,最终导致关节强直,生活自理能力丧失。免疫反应是RA发病和病情迁延的中心环节,感染、内分泌、遗传和环境等因素增加了疾病的易感性。 本文初步探讨了阻断IL-7/IL-7R信号通路治疗RA的免疫学调节机制。通过测序研究中国汉族RA人群IL-7Rα基因rs6897932位点单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP),阐明IL-7R基因多态性与RA的相关性;通过ELISA检测RA患者外周血中IL-7、IFN-γ、IL-17、TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-21、IL-23和MMP-13等细胞因子含量,分析IL-7与其他细胞因子的相关性;应用流式细胞术研究IL-7Rα在健康对照者和RA患者T细胞亚群中的分布情况,以及IL-7对naive CD4+T细胞的增殖、分化所产生的影响。体内实验采用Ⅱ型胶原蛋白免疫DBA/1J小鼠建立CIA模型,小鼠发病后分别给予IL-7Rα抗体及其同型对照抗体治疗,通过比较治疗组和对照组小鼠脾脏细胞培养上清中IFN-γ、IL-17、TNF-α等细胞因子含量及不同T细胞亚群的表达格局,明确IL-7R抗体治疗CIA的作用机制。 研究结果显示:在中国汉族RA人群中,IL-7Rα基因rs6897932位点SNP与疾病发病易感性关联无统计学意义,但与健康对照相比,RA患者该位点等位基因C比例有所增高,T比例有所降低,提示C可能为RA发病的危险基因;基因型为CC的RA患者血浆中的炎性细胞因子含量显著高于基因型为TT和TC的RA患者。RA患者血浆中IL-7及其它炎性细胞因子水平都明显增高,分析发现IL-7与IFN-γ、TNF-α、IL-1β分泌水平具有明显正相关,IL-7可以促进IFN-γ、TNF-α的分泌,并促进了naive CD4+T细胞向Th1细胞分化。我们的研究结果还表明IL-7Rα在健康对照者和RA患者PBMC中的CD4+T细胞上高表达,且RA患者IL-7Rα表达水平明显高于健康对照。体内实验结果显示小鼠IL-7Rα抗体治疗可明显缓解CIA临床症状,减少关节炎性细胞浸润和软骨破坏,抑制CⅡ反应性T细胞的增殖,通过减少脾脏致病性Th1和Th17细胞亚群数量,减少炎性细胞因子的分泌和相应转录因子的表达而达到免疫调节作用。 研究结果提示IL-7Rα基因rs6897932位点SNP与RA的发病易感性无关联,但与RA患者血浆中炎性细胞因子的含量具有明显关联;在外周血中,IL-7主要通过促进IFN-γ、TNF-α等炎性细胞因子的分泌及CD4+T细胞的增殖而加重RA炎症;体内应用IL-7Rα抗体治疗后能显著改善CIA小鼠的临床症状,减少炎症细胞浸润和软骨破坏,表明IL-7Rα抗体具有临床治疗RA的潜在研发价值。