叶黄素对鹌鹑生长及免疫机能影响的研究

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叶黄素是天然色素的一种,属含氧类胡萝卜素中的叶黄素类,大量的研究表明叶黄素具有调节动物体液免疫和细胞免疫反应、增强巨噬细胞吞噬活性、抑制肿瘤细胞增殖、修饰细胞表面标志和信号分子等功能,然而叶黄素在提高禽类免疫方面的研究报道很少,研究多集中于改善畜禽和水产品色泽方面,对禽类免疫性能特别是母源添加叶黄素对后代生长发育及免疫性能的影响尚未见报道。本论文以朝鲜龙城鹌鹑为试验对象,采用小麦-豆粕型基础日粮,研究不同剂量叶黄素对母代和子代鹌鹑生长及免疫机能的影响。1、试验基础日粮的选择选取1日龄朝鲜龙城鹌鹑240羽,按体重随机分为3个处理组,每处理设2个重复,每重复40羽,预饲至21日龄可鉴别雌雄时,选择体重相近的雌性鹌鹑108羽,随机分成3个处理组,每组设3个重复,每重复12羽,分别饲喂玉米-豆粕型基础日粮、小麦-豆粕型基础日粮、小麦添加酶制剂日粮,饲养期10周。采用高效液相色谱(HPLC)法检测饲料中叶黄素的含量,统计0~3周、4~6周、7~8周、9~10周不同阶段的生长及产蛋性能。结果表明:HPLC法测定叶黄素在446nm处有最大吸收峰,采用乙腈-甲醇(95:5,v/v)作为流动相可以有效地分离出饲料中的叶黄素,而且回收率较高,小麦-豆粕型基础日粮中叶黄素含量显著低于玉米基础日粮;在生产性能方面,不同日粮对育雏期(0~21日龄)鹌鹑生长性能没有显著影响;在育成期(22~42日龄)阶段,小麦日粮和小麦加酶日粮的日增重显著低于玉米对照组,但在采食量和料重比上没有显著差异;产蛋性能方面,小麦加酶日粮能够显著提高鹌鹑产蛋率。因此可以用小麦添加酶制剂替代玉米作为鹌鹑基础日粮。2、叶黄素对鹌鹑生产性能及组织叶黄素含量的影响试验选取1日龄朝鲜龙城父母代鹌鹑320羽,按体重随机分为4个处理组,每处理设2个重复,每重复40羽,预饲至21日龄可鉴别雌雄时,选择体重相近的鹌鹑144羽,雌雄比为3:1,按照体重随机分为4个处理组,每组设3个重复,每重复12羽(9雌3雄)。采用试验一确定的小麦-豆粕型基础日粮添加0.02%木聚糖酶,4个处理组日粮中分别添加0(对照组)、50mg/kg、100mg/kg、150mg/kg叶黄素(万寿菊提取物),饲养期10周。测定叶黄素对鹌鹑生产性能的影响,开产后收集种蛋,每周末用全自动色差分析仪测定蛋黄L(亮值)、a(红值)、b(黄值)值;60日龄时HPLC法检测鹌鹑血清、肝脏及卵黄叶黄素含量。结果表明:小麦加酶日粮中添加叶黄素对鹌鹑日增重、采食量没有显著影响,但叶黄素可以显著提高鹌鹑产蛋率;饲料中添加叶黄素可以改善蛋黄色泽,显著增加蛋黄a值和b值,并显著降低蛋黄L值,且叶黄素改善蛋黄色泽主要是通过增加蛋黄b值来提高;HPLC测定结果表明组织叶黄素的含量随饲料叶黄素的增加而显著提高。3、叶黄素对母鹌鹑免疫性能的影响在试验二基础上,于饲养21、42日龄采血后摘除免疫器官,称重后计算免疫器官指数。测定细胞免疫反应及新城疫二次免疫抗体效价,ELISA法检测血清及卵黄IgG含量,结果表明:日粮中添加叶黄素对鹌鹑免疫器官发育有一定的影响,且与叶黄素的添加量有关,低剂量可以显著降低育雏期鹌鹑脾脏指数,但对胸腺和法氏囊指数没有显著影响;对鹌鹑免疫性能的测定结果表明,叶黄素对植物血球凝集素-P诱导的皮肤超敏反应无显著影响,但叶黄素可以延缓新城疫抗体效价的降低,并显著提高卵黄IgG含量。4、叶黄素对子代鹌鹑孵化性能、母源抗体水平及抗氧化能力的影响在试验三的基础上,待全部试验鹌鹑产蛋率达到75%以上时收集种蛋,测定蛋清溶菌酶含量,之后对种蛋进行孵化,观察并测定叶黄素对鹌鹑孵化性能的影响;出雏后子代鹌鹑在相同条件下饲养,饲料中不添加叶黄素,饲养期3周。出雏后HPLC法测定血液、肝脏、卵黄囊的叶黄素含量;于饲养第1、3、7、14、21日采血检测血清IgG含量;测定14、21日龄时血清抗氧化酶活性。结果表明:叶黄素可以显著提高种蛋溶菌酶含量;叶黄素对胚胎发育具有显著促进作用,可以显著提高种蛋的受精率和孵化率,并降低死胚率;组织叶黄素测定结果表明:卵黄囊叶黄素含量最高,但子代鹌鹑血清叶黄素含量初生时并不显著;叶黄素可以显著降低雏鹑的死亡率,提高雏鹑成活率;150mg/kg叶黄素可以显著提高初生鹌鹑血清IgG含量;叶黄素对子代鹌鹑血清抗氧化酶活性在鹌鹑育雏期有一定的抑制作用,但随着日龄的增加,血清抗氧化酶活性无显著差异。综合上述试验结果,可以得出:叶黄素对鹌鹑生长性能没有显著影响,但可以显著提高鹌鹑产蛋率;叶黄素可以显著改善蛋黄色泽,并且主要通过增加蛋黄b值来加深蛋黄色泽;叶黄素的组织沉积量与饲料中的叶黄素添加量显著相关;叶黄素可以显著提高种蛋溶菌酶含量,促进胚胎发育并显著提高鹌鹑的孵化率、降低死胚率;叶黄素可以显著提高卵黄IgG含量和初生鹌鹑血清IgG含量,对提高雏鹑饲养成活率具有重要作用。
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