目的:通过“吐鲁番斗鸡攻击行为的表型与基因型分析”探讨吐鲁番斗鸡攻击行为表型和基因型的遗传特点,寻找可作为吐鲁番斗鸡攻击行为的分子标记,把分子标记辅助选择应用于吐鲁番斗鸡攻击行为的选育,为吐鲁番斗鸡攻击行为的分子育种奠定基础。方法:选择攻击性强的吐鲁番斗鸡与攻击性弱的新罗曼蛋鸡杂交产生F1代,采用荧光定量PCR技术确定SLC6A4基因与NR2E1基因在攻击性强的吐鲁番斗公鸡、攻击性弱的新罗曼蛋公鸡和F1代的大脑从出壳到性成熟不同时期阶段的表达变化;通过F1代鸡全同胞交配产生F2代,采集亲本、F1代和F2代三代四种类型鸡的血液样本,通过PCR-SSCP方法检测与攻击行为相关的SLC6A4基因与NR2E1基因全部外显子区和部分内含子区的SNP多态性,然后采用“镜像自斗法”和“配对打斗法”测定亲本、F1代的攻击行为表型,然后通过攻击行为表型与攻击行为相关的基因型之间进行方差分析验证SLC6A4基因和NR2E1基因与吐鲁番斗鸡攻击行为的关联性。结果:(1)通过对SLC6A4基因表达量在7个时期的分析发现其趋势成波浪形,0月龄、3月龄、6月龄都有较高的表达;在三种鸡群中不同时间段的表达量中发现SLC6A4的表达量与攻击行为呈正相关。NR2E1基因在7个时期的表达量呈逐渐升高趋势,且表达量均在6月龄达到最高;三种鸡群中不同时间段的表达量中发现NR2E1的表达量与攻击行为呈负相关。表明SLC6A4基因、NR2E1基因与吐鲁番斗鸡的攻击行为具有一定的相关,为后续的SLC6A4基因和NR2E1基因多态性分析奠定了理论基础,旨在获得SLC6A4基因和NR2E1基因的分子标记,为吐鲁番斗鸡的分子标记辅助选择提供参考依据。(2)在SLC6A4基因的外显子多态性检测中发现第一外显子有两个碱基突变位点(T6213768G、C6213750G)引起氨基酸的改变,且第一外显子的SNP位点所造成基因型的改变在吐鲁番斗鸡和新罗曼蛋鸡中有显著不同的优势等位基因和优势基因型。因此,进一步证实SLC6A4基因第一外显子的多态性可能与攻击行为有关,而在NR2E1基因的外显子多态性检测中未发现与攻击行为相关的基因多态性。(3)镜像打斗试验中,吐鲁番斗公鸡的直接攻击(Fighting)极显著高于杂交子一代公鸡(P<0.01);而在非直接攻击(Non-fighting)上两者差异不显著。在配对打斗试验中,吐鲁番斗鸡的直接攻击(Fighting)显著高于杂交子一代(p<0.05),然而二者之间在非直接攻击(Non-fighting)行为变量上的表现为差异不显著(P>0.05)。(4)通过SLC6A4第一外显子的基因型与镜像和配对打斗测得表型的关联分析发现具有BB基因型的斗鸡与F1代的攻击性在镜像打斗试验中和配对打斗试验中均显著高于其它基因型的鸡,从而说明第一外显子的BB基因型与攻击行为有密切的相关性。结论:通过对攻击行为强的吐鲁番斗鸡、攻击行为弱的新罗曼蛋鸡及其杂交F1不同时期SLC6A4基因和NR2E1基因表达检测发现SLC6A4基因表达与攻击行为呈正相关,而NR2E1的基因表达则与攻击行为呈负相关;进而通过SLC6A4与NR2E1在吐鲁番斗鸡,新罗曼蛋鸡及F1、F2代的SNP多态性进行分析,在SLC6A4第一外显子内寻找到了与攻击行为相关的分子标记;通过吐鲁番斗鸡与F1代的表型检测发现两者之间在攻击性方面有显著的差异,进而通过攻击行为的表型与SLC6A4第一外显子的基因型关联分析发现BB基因型与攻击行为具有的相关性,可作为吐鲁番斗鸡分子辅助标记选择的参考基因型。