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目的：糖尿病（diabetes mellitus, DM）作为一种人们熟知的代谢性疾病，随着国家的发展以及人们生活方式的改变，已经成为导致人类死亡的第三大原因。糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy, DR）作为糖尿病眼部病变最严重的并发症，导致了每年不可逆的视力丧失的人数持续上升。其中老年黄斑变性（age-related macular degeneration，AMD）成为老年人群视力丧失的最常见原因，在65岁以上的老年人中，每3个人中就会有一个受到AMD的影响。而国内外许多实验研究以及临床试验都显示：氧化应激以及炎症已经成为AMD发生发展的两大非常重要的原因。而视网膜本身也容易受到氧化应激的影响，原因是代谢旺盛的视网膜的氧消耗量远远高于机体其他任何组织，多不饱和脂肪酸易被氧化且会激发具有细胞毒性的连锁反应。当前已经有大量的研究显示：应用高糖培养基刺激视网膜色素上皮细胞（retinal pigment epithelial, RPE），模拟糖尿病时RPE细胞在体内的高糖环境，造成细胞的氧化应激状态，并应用药物进行干预，结果显示高糖使细胞的活力下降，使一些细胞因子、炎性因子的表达发生变化，对RPE细胞造成损伤。本实验应用不同浓度的八肽胆囊收缩素（Cholecystokinin octapeptide，CCK-8)作用于高糖培养的大鼠RPE细胞，培养48小时后，MTT法检测细胞活力以及NRF2、SOD1、γ-GCS、NQO1、TNF-α、IL-1α、及IL-6的表达的变化，根据结果筛选出CCK-8合适的治疗浓度，观察此浓度作用RPE细胞24小时、48小时及72小时上述因子的表达变化。方法：1筛选CCK-8治疗浓度：培养大鼠RPE细胞，取对数生长期细胞进行实验，随机分为8组：①正常对照组（葡萄糖浓度：5.56mmol/L）②高糖组（葡萄糖浓度：30mmol/L）③高渗对照组（葡萄糖浓度：5.56mmol/L+甘露醇：24.44mmol/L）④高糖+CCK-8治疗组（葡萄糖浓度：30mmol/L+CCK-8浓度：10-5mmol/L）⑤高糖+CCK-8治疗组（葡萄糖浓度：30mmol/L+CCK-8浓度：10-6mmol/L）⑥高糖+CCK-8治疗组（葡萄糖浓度：30mmol/L+CCK-8浓度：10-7mmol/L）⑦高糖+CCK-8治疗组（葡萄糖浓度：30mmol/L+CCK-8浓度：10-8mmol/L）⑧高糖+CCK-8治疗组（葡萄糖浓度：30mmol/L+CCK-8浓度：10-9mmol/L），各组细胞应用同种培养液培养24小时后换成条件培养液，继续培养48小时，倒置显微镜下观察细胞形态，应用MTT法检测不同浓度CCK-8对细胞活力的影响，同时收集细胞标本，进行RT-PCR实验，检测NRF2、SOD1、γ-GCS、NQO1、TNF-α、IL-1α、IL-6表达的变化。2不同时间段CCK-8治疗浓度10-6mmol/L相关因子变化：根据MTT及RT-PCR的结果得出CCK-8的治疗浓度为10-6mmol/L，再次分组：①正常对照组（葡萄糖浓度：5.56mmol/L）②高糖组(葡萄糖浓度：30mmol/L)③高渗对照组(葡萄糖浓度：5.56mmol/L+甘露醇：24.44mmol/L)④高糖+CCK-8治疗组（葡萄糖浓度：30mmol/L+CCK-8浓度：10-6mmol/L），各组细胞分别培养24小时、48小时、72小时，取相应时间段细胞标本进行RT-PCR检测上述7种因子表达。结果：1MTT法检测结果：与正常对照组比较，高糖组细胞的活力明显降低（P<0.05），高渗对照组细胞活力未见明显改变；各不同浓度治疗组的细胞活力低于正常对照组，具有明显差异（P<0.05），CCK-8浓度为10-7mmol/L、10-8mmol/L、10-9mmol/L三组之间细胞活力无明显差异，三组与高糖组相比无明显差异，CCK-8浓度为10-6mmol/L与10-5mmol/L两组之间细胞活力无明显差异，但要高于其他三组治疗组和高糖组（P<0.05）。2筛选CCK-8治疗浓度阶段RT-PCR结果：与正常对照组比较，高糖组NRF2、SOD1、γ-GCS、NQO1、TNF-α、IL-1α、IL-6的表达上升（P<0.05），高渗对照组的表达未见明显差异。各不同浓度治疗组与正常对照组相比，其中NRF2、SOD1、γ-GCS及NQO1的表达明显上升（P<0.05），TNF-α、IL-1α及IL-6的表达明显下降（P<0.05）。与高糖组相比，CCK-8浓度为10-7mmol/L、10-8mmol/L、10-9mmol/L三组中NRF2、SOD1、γ-GCS及NQO1的表达上升（P<0.05），TNF-α、IL-1α及IL-6的表达下降（P<0.05），但是三组之间未见明显差异。CCK-8浓度为10-6mmol/L与10-5mmol/L两组之间未见明显差异，但与其他三组治疗组及高糖组相比，NRF2、SOD1、γ-GCS及NQO1的表达明显上升（P<0.05），TNF-α、IL-1α及IL-6的表达明显下降（P<0.05）。3不同时间段CCK-8治疗浓度10-6mmol/L相关因子变化：与正常对照组相比，高渗对照组7因子的表达未见明显差异；高糖组与正常对照组及高渗对照组相比，上述7种因子的表达明显上升（P<0.05）；与高糖组相比，治疗组NRF2、SOD1、γ-GCS及NQO1表达明显上升（P<0.05），48小时高于24小时及72小时（P<0.05），24小时及72小时之间无明显差异；与高糖组相比，治疗组TNF-α、IL-1α及IL-6表达下降（P<0.05），72小时的表达低于24小时和48小时（P<0.05），24小时和48小时间的表达无明显差异。结论：1高糖环境可导致大鼠RPE细胞损伤，细胞活力降低。210-6mmol/L浓度的CCK-8以及一定的作用时间后可以抑制高糖对细胞带来的损伤，使NRF2、SOD1、γ-GCS及NQO1表达明显上升，TNF-α、IL-1α及IL-6的表达明显下降，提示了CCK-8可能通过抗氧化作用以及抗炎症作用维持了细胞内平衡状态，保护大鼠RPE细胞。为CCK-8在临床中的应用奠定了实验基础。