研究目的：通过对柯萨奇病毒(CVB3)心肌炎细胞毒T细胞(CTL)亚类(ACTL、VCTL、MCTL)TCRCDR3Vβ基因取用格局的分析，确定触发免疫反应性心肌损伤的特异性CTL细胞克隆，揭示疾病的发病机制，为阻断CTL与心肌细胞的结合最终达到防治病毒性心肌炎的目的提供先决条件。 方法：①选体重25-30克，6-8周龄的雄性Balb/c鼠，每只腹腔内注射6×104PFU的CVB3，制作CVB3心肌炎动物模型，同体重、同周龄的雄性Balb/c鼠作为对照组； ②无菌摘取取72小时内新生Balb/c鼠心脏，培养单层心肌细胞； ③单层心肌细胞分为三组，分别用CVB3处理、放线菌素D处理和不经过任何处理； ④无菌摘取CVB3心肌炎鼠肠系膜淋巴结及腹股沟淋巴结，制成单细胞悬液，分别将细胞悬液加入上述三组单层心肌细胞，采用免疫吸附法获取ACTL、VCTL、MCTL； ⑤采用MTT法对ACTL、VCTL、MCTL和对照组T细胞进行细胞毒鉴定，分别计算OD值及细胞毒活性； ⑥分别设计CTL的Vβ引物作为上游引物，Cβ引物作为下游引物；⑦常规进行RT-PCR，PCR反应产物琼脂糖凝胶上电泳，确认PCR反应产物，并据此判断TCRVβ基因的取用格局。 结果：实验组ACTL、VCTL、MCTLOD值均值分别为0.42、0.43、0.43，而对照组T细胞OD值均值为0.82，实验组三类CTL间两两比较OD值差别无统计学意义(p均大于0.01)，而实验组三类CTL与对照组T细胞间两两比较OD值差别有统计学意义(p均小于0.01)。实验组ACTL、VCTL、MCTL细胞毒活性均值分别为72％、69％、71％，对照组T细胞细胞毒活性均值为19％，实验组三类CTL间两两比较细胞毒活性差别无统计学意义(p均大于0.01)，而实验组三类CTL与对照组T细胞间两两比较细胞毒活性差别有统计学意义(p均小于0.01)。对照组T细胞表达TCRVβ基因的全部20个家族，而实验组三类CTL的Vβ基因取用格局呈现明显的限制性，ACTL优势表达Vβ6、Vβ8.1、Vβ8.2、Vβ8.3，MCTL优势表达Vβ5.1、Vβ8.1、Vβ8.2、Vβ8.3，而VCTL优势表达Vβ7、Vβ8.1、Vβ8.2、Vβ8.3。 结论：细胞毒T细胞在CVB3心肌炎的发病机制中扮演了重要的角色，导致心肌细胞损伤的CTL受到特异性抗原刺激后其TCRVβ基因取用格局呈现明显的限制性，CTL的分化为克隆性增生，同时，CVB3感染小鼠后导致宿主心肌细胞表达多种抗原。提示通过分析CVB3心肌炎TCRVβ基因的优势表达和克隆性增殖，可了解宿主的细胞免疫状态，并为临床上进一步开展特异性免疫治疗提供新的基础实验材料。