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癌症的发病率和死亡率逐年上升,而目前治疗癌症的方法以放疗和化疗为主,虽有治疗作用,但同时对人体正常组织有很大的伤害作用。因此,开发新型抗肿瘤药物是科学研究的热点和未来的发展趋势。大量研究表明,多酚类物质具有抗肿瘤作用,可做为开发新型抗肿瘤药物的原料。本文以红皮云杉为研究对象,优化了超声波辅助提取、微波辅助提取红皮云杉多酚的工艺条件和大孔吸附树脂法纯化红皮云杉多酚的工艺条件,鉴定了红皮云杉多酚的主要组分,并系统研究红皮云杉多酚体外抗肿瘤活性及体内抗肿瘤作用及途径,本文主要内容如下:1.通过单因素试验和响应面优化试验,优化了超声波辅助提取和微波辅助提取红皮云杉多酚的工艺条件,得到超声波辅助提取法的最佳工艺条件为:料液比1:33、超声波功率301W、乙醇浓度40%,提取温度60℃C,提取时间2.4h,红皮云杉多酚的得率为18.92%;微波辅助提取法的最佳工艺条件为:料液比1:31、微波功率295W、提取时间46s,乙醇浓度40%,红皮云杉多酚的得率17.38%。2.通过单因素试验和正交优化试验,得到D-101大孔吸附树脂纯化红皮云杉多酚的最佳工艺条件为:上样量25mL、径长比1:25、洗脱剂浓度70%、洗脱流速2.0mL/min。采用高效液相色谱对红皮云杉多酚的组分进行分析,确定其主要组分为对香豆酸、水杨酸、异槲皮苷和儿茶素,含量分别为31.91%、24.85%、2.54%和1.52%。3.通过MTT试验发现红皮云杉多酚对S180肿瘤细胞增殖的抑制作用最强,其次是A549,而对A375、SY5Y、Hepg-2和Skov3肿瘤细胞增殖的抑制作用较弱。通过细胞形态学观察发现,随着剂量的增加,红皮云杉多酚对S180肿瘤细胞的增殖有明显的抑制作用,且表现出一定的量效关系。通过单细胞凝胶电泳试验检测红皮云杉多酚对S180和A549肿瘤细胞DNA的损伤作用,结果显示红皮云杉多酚对S180和A549肿瘤细胞DNA有明显的损伤作用,并表现出明显的量效关系,其中对S180肿瘤细胞DNA的损伤作用更强。采用流式细胞仪对红皮云杉多酚作用后S180和A549的细胞周期进行分析,发现红皮云杉多酚可有效地阻滞S180和A549肿瘤细胞于G0/G1期,使其不能进入S期进行DNA合成,进而诱导肿瘤细胞凋亡。4.通过对S180荷瘤小鼠进行辐射伤害,研究红皮云杉多酚对在辐射伤害状态下S180荷瘤小鼠的抗肿瘤作用。结果表明,红皮云杉多酚对S180荷瘤小鼠的肿瘤有显著的抑制作用,高、中、低剂量组对S180实体瘤的抑制率分别为54.15%、42.24%、23.00%,同时对辐射伤害也具有显著的防护作用,而CTX抑制肿瘤作用虽然比高剂量的红皮云杉多酚强,但是对辐射伤害没有防护作用。5.通过HE染色观察发现,CTX和高剂量红皮云杉多酚可明显抑制肿瘤细胞的增殖,CTX的效果好于高剂量红皮云杉多酚。进一步通过免疫组化染色试验研究S180荷瘤小鼠肿瘤细胞中Bax、Bcl-2、p53、β-catenin、Cyclin D1和NF-κB表达的变化,从而分析红皮云杉多酚的体内抗肿瘤作用途径。结果表明,CTX和高剂量红皮云杉多酚显著上调Bax和p53表达、下调Bcl-2、β-catenin、Cyclin D1和NF-κB表达,通过抑制Wnt/β-catenin通路和NF-κB通路发挥其抗肿瘤作用,而NF-κB通路可能与其它通路存在交互作用。