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目的:
探讨恒定磁场对骨髓基质干细胞体外诱导成骨过程中细胞增殖,矿化及蛋白表达的影响,以初步了解恒定磁场的成骨作用。
方法:
体外培养大鼠骨髓基质干细胞,测定恒定磁场强度。实验分为2组,对照组为常规诱导成骨组(在DMEM培养基中加入0.1uM地塞米松,10mMβ—磷酸甘油钠,0.2mM维生素C进行成骨诱导),实验组除常规诱导成骨外,置于0.2T磁感应强度恒定磁场中,分别加载1,3,5,7天,每天24小时。噻唑蓝比色法(MTT法)检测两组细胞增殖活性。VonKossa矿化结节染色观察矿化程度。收集细胞,应用蛋白质印迹技术检测两组中BMP-2和COLⅠ的蛋白表达情况.
结果:
成骨诱导第3,5,7天,磁场诱导组细胞增殖大于单纯药物诱导组(P<0.05)。VonKossa染色第7天实验组较对照组有明显的银沉积。成骨诱导第1,3天两组中BMP-2和COLⅠ的蛋白表达无统计学差异。第5天BMP-2蛋白表达磁场组明显高于药物诱导组,两组之间的差异有显著差异(P<0.05)。第5天两组中COLⅠ的蛋白表达无统计学差异。第7天两组中BMP-2和COLⅠ的蛋白表达无统计学差异。
结论:
0.2T的恒定磁场增强了BMMSCs在体外诱导成骨过程中成骨分化能力,并提高了成骨标志蛋白BMP-2的表达。