目的：构建编码缝隙连接蛋白connexin30(Cx30)的致病基因GJB6及其3种突变体的慢病毒过表达载体,并分析其在人永生化角质形成细胞(HaCaT)中的表达。资料与方法：构建GJB6基因及其突变体(G11R、A88V、V37E)的过表达慢病毒载体,转染入293T细胞,应用荧光倒置显微镜、Real time定量PCR法(q-pcr)、Western Blot等检测其表达情况,并转染HaCaT细胞,在荧光倒置显微镜下观察荧光表达及蛋白的初步定位。结果：成功构建了该基因野生型及突变体慢病毒表达载体,并将G11R和A88V突变体成功转染HaCaT细胞。构建及转染过程中发现：野生型重组质粒转染293T细胞后有强荧光显示,WB检测强阳性条带；3种突变型重组质粒转染293T细胞后,A88V突变型转染细胞内观察到较强荧光,G11R有弱荧光,而V37E突变型未观察到荧光或较弱,但WB检测均有弱阳性条带,说明目的基因有表达但较野生型低。将构建的G11R和A88V突变体慢病毒表达载体转染Hacat细胞,可观察到弱的荧光；V37E突变型未观察到荧光或较弱,且有HaCaT细胞大量死亡现象。结论：野生型GJB6转染HaCaT细胞后蛋白能够定位于细胞膜,3种突变体中只有G11R和A88V突变体可定位于细胞膜但其编码的Cx30表达量较少,初步推测不同GJB6突变体或不能定位于角质形成细胞膜或不能形成功能性的Cx30,影响了角质形成细胞正常的增殖和分化。