变形链球菌延伸因子(EF-Tu)tuf基因的克隆及序列分析

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变形链球菌(Streptococcus mutans,以下简称变链)是龋病的主要致病菌之一,耐酸性是其关键的毒力因子。变链作为口腔中最耐酸的细菌,目前多数研究都集中在与其粘附性相关基因的研究,但对于开发变链耐酸性基因则显得不足,变形链球菌在pH值低至4.0时仍能代谢蔗糖产酸,有助于维持菌斑的低pH环境,使牙面脱矿破坏,而其他很多致龋菌则不能在pH值小于5.0的酸性环境中进行糖酵解。变链在低pH环境中能够继续生长、代谢的分子机制尚未明了,其中包括在蛋白质合成过程中负责肽链延伸的延伸因子(EF-Tu),还需要大量的科研工作来揭示其作用机制。本试验以该基因作为靶点,采用PCR方法,以变链染色体DNA为模板扩增延伸因子tuf基因,得到tuf基因全长共1197bp,克隆至pMD18-T载体后进行序列分析,登陆Gene-Bank申请序列号为EF536028,目的是寻找一个新的与变形链球菌耐酸性相关的基因,为进一步研究变链延伸因子在变链耐酸过程中的作用机制奠定良好基础,为龋病的防治提供新的思路。
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