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目的:考察酸枣仁合欢方(SHF)皂苷部位解郁安神的有效成分;优化酸枣仁合欢方皂苷部位的提取分离方法;建立SHF皂苷部位的指纹图谱;同时建立酸枣仁合欢方(SHF)及SHF皂苷部位制剂中四种有效成分的含量测定方法。在此基础上,又建立了同时测定SHF皂苷部位中六种指标成分含量的分析方法。方法:1、选用经典的抑郁与催眠小鼠模型,评价酸枣仁合欢方皂苷部位解郁安神有效成分;2、优化酸枣仁合欢方皂苷部位提取分离方法,采用醇提取法结合大孔吸附树脂AB-8纯化,制备SHF皂苷部位;应用紫外分光光度法测定S HF皂苷部位中总皂苷的含量;3、应用高效液相-二极管阵列法(HPLC-DAD)建立酸枣仁皂苷部位的指纹图谱;建立同时测定SHF皂苷部位中酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B、白桦脂酸和白桦脂醇含量的方法,并测定SHF皂苷部位颗粒剂中四种有效成分的含量。在此含量测定方法的基础上,又进一步建立了同时测定SHF皂苷部位中芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酰芍药苷、氧化芍药苷、(-)-丁香树脂酚-4-O-β-D-呋喃芹糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷((-)-丁香树脂酚糖苷)、白桦酯酸等六种指标成分含量的方法。结果:1、阈上剂量戊巴比妥钠协同实验结果表明酸枣仁白桦脂醇和白桦脂酸均有催眠作用。在悬尾实验和强迫游泳实验中,给药组与模型组相比小鼠TST和FST不动时间显著缩短,差异有统计学意义(P<0.05)。2、建立SHF皂苷部位指纹图谱,确定了 15个共有峰,指认了 6个化合物,测定的8批样品指纹图谱相似度均大于0.92。采用高效液相-二极管阵列法建立SHF皂苷部位中酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B、白桦脂酸、白桦脂醇的含量测定方法,色谱条件为:采用色谱柱Agilent TC-C18柱(4.6 mm × 250 mm,5 μm);流动相:乙腈-0.1%磷酸水,梯度洗脱;运行时间:85 min,线性梯度洗脱程序为:0～12 min,22%～30%A;12～13 min,30%～33%A;13～26 m in,33%～39%A;26～31 min,39%～42%A;31～34 min,42%A;34～40 min,42%～63%A;40～56 min,63%～77.8%A;56～62 min,77.8%A;62～66 min,77.8%～78.2%A;66～85 min,78.2%～100%A,85～90 min,100%A。流速:1 mL·min-1,柱温:30℃,进样量:20μL;检测波长:204 nm。在此色谱条件下各峰达到完全分离,分离度良好,得到回归方程分别为:酸枣仁皂苷A:Y=25.762 X-281.14,r=0.9996;酸枣仁皂苷B:Y=36.597 X-255.45,r=0.9996;白桦脂酸:Y=132.88 X-1333.5,r=0.9999;白桦脂醇:Y=219.16 X-192.64,r=0.9999,在各自的测定浓度范围内,酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B、白桦脂酸、白桦脂醇的线性关系均良好。在相同的测定条件下,只改变线性梯度洗脱程序建立了 SHF皂苷部位中芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酰芍药苷、氧化芍药苷、(-)-丁香树脂酚-4-O-β-D-呋喃芹糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷、白桦酯酸的含量测定方法,新的线性梯度洗脱程序为:0～9 min,7%～14%A;9～20 min,14%A;20～31 min,14%～20%A;31～32 min,20%～23%A;32～44 min,23%～32%A;44～52 min,32%～36%A;52～65 min,36%～63%A;65～85 min,63%～100%A。流速:1 mL·min-1,在此色谱条件下各峰能达到完全分离,分离度良好,得到回归方程分别为:芍药内酯苷:Y=16.68 X-51.14,r=0.9997;芍药苷:Y=22.86 X-77.24,r=0.9997;苯甲酰芍药苷:Y=23.00 X-8.975,r=0.9996;氧化芍药苷:Y=20.52 X+16.84,r=0.9997;(-)-丁香树脂酚-4-O-β-D-呋喃芹糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷:Y=111.2 X-1059,r=0.9996;白桦酯酸:Y=12.37 X-14.57,r=0.9996。在各自的测定浓度范围内,芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酰芍药苷、氧化芍药苷、(-)-丁香树脂酚-4-O-β-D-呋喃芹糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷、白桦酯酸等六种指标成分的线性关系均良好。结论:酸枣仁合欢方中所含成分白桦脂醇和白桦脂酸具有明显的抗抑郁及催眠作用,故可作为酸枣仁合欢方解郁安神的有效成分用于质量控制。优化了 SHF皂苷部位提取方法,该方法简单、易行,适用于大规模工业生产。通过研究中药有效部位指纹图谱,初步阐明了方剂配伍的合理性。建立的一次进样同时测定君药酸枣仁中四种有效成分的方法,可用于皂苷部位及其颗粒剂的质量控制;而建立的同时测定全方中六种指标成分含量的方法,可以更全面的控制皂苷部位的质量。同时也能节约测量时间,简化测量步骤,且HPLC-DAD测定方法准确、灵敏度高、重现性好,为制定SHF皂苷部位的质量控制标准提供了科学依据,为研制有效、质量可控的创新中药提供了理论依据及实验依据。