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目的:CD133+细胞是脐带血中重要的干细胞组分之一,假设在单个核细胞心力衰竭(heart failure, HF)治疗中发挥作用的是某一种组分,那么多组分共存产生的空间位阻效应可以影响这一组分进入心肌的数量,因而纯化的单一组分移植将提高治疗效果。本研究想要证实CD133+细胞在人脐带血单个核细胞移植治疗心力衰竭中所起的作用,即CD133+细胞4周后是否定植在小鼠心脏组织中,以及是否与其它组分具有协同作用。方法:健康的8周龄Balb/C裸小鼠26只,称重,随机数表法将小鼠随机选出5只,作为假手术对照组。其余小鼠腹腔注射异丙肾上腺素(Isoprenaline, ISO)造模,5mg/Kg/天,共5天,假手术对照组腹腔注射同等体积生理盐水作对照。小鼠常规饲养,观察1周后,腹腔注射异丙肾小鼠随机分为4组,每组5只,剪耳朵标记,命名为:CD133+细胞组、CD133细胞组、单个核细胞组和心衰对照组。采集足月妊娠顺产婴儿脐带血,3小时内,用淋巴细胞分离液法提取单个核细胞,经免疫磁珠分离CD133+细胞和CD133-细胞,用PBS稀释,细胞计数板计数所得细胞,细胞数在105/mL。经鼠尾静脉,CD133+细胞组注射CD133+细胞1mL,CD133-细胞组注射CD133-细胞1mL,单个核细胞组注射经免疫磁珠分离后混合的单个核细胞1mL,心衰对照组和假手术对照组注射等量的PBS液1mL。常规饲养,4周后称重,经心内穿刺取血,测血清MMP-9浓度。处死后开胸取心脏、肝脏及肺脏称重,石蜡包埋心脏,做HE染色、Masson染色检验心肌纤维化和心肌细胞破坏程度,免疫组化及免疫荧光染色检测是否存在人源性细胞。结果:(1)实验前,各组小鼠体重组间比较,差异无统计学意义;观察期末,异丙肾造心衰模型各组小鼠体重明显减低(分别为21.54±1.82g,22.2±1.72g,21.16±1.99g,21.66±1.06g),与假手术组(24.48±1.45g)比较,差异均有统计学意义(p<0.05),但异丙肾造心衰模型各组间比较,差异无统计学意义;实验前后体重变化,心衰对照组(3.34±1.42g)明显高于假手术组(0.88±0.29g),但异丙肾造心衰模型各组间比较(分别为3.18±0.24g,2.92±3.38g,2.96±1.47g,3.3±1.42g),差异无统计学意义。实验后异丙肾造心衰模型各组小鼠心脏、肝脏、肺脏质量明显大于假手术组,差异有统计学意义,但异丙肾造心衰模型各组间比较,差异均无统计学意义。(2)HE染色结果显示,心衰造模各组小鼠,心肌排列紊乱,显示局限性心肌坏死,且主要集中在左室心尖部、左心室游离壁及室间隔位置,假手术组未发现明显心肌紊乱;Masson染色可见心衰对照组(6277.97±374.18)和CD133细胞组(6037.45±194.23),蓝色胶原纤维平均面积明显增大(与假手术对照组相比,p<0.05),单个核细胞组(3290.30±424.41)和CD133+细胞组(2794.30±191.24)胶原纤维面积次之,假手术对照组(366.23±169.17)最小。与单个核细胞组相比,CD133+细胞组胶原纤维平均面积更小,差异有统计学意义(p<0.05)。(3)免疫组化及免疫荧光染色均未在小鼠心脏组织中找到特异性人源性细胞。(4)小鼠经鼠尾静脉注射细胞移植后4周,MMP-9浓度检测结果显示,腹腔注射异丙肾上腺素造心衰模型各组,其血清MMP-9浓度,组间比较(分别为1.61±0.68ng/mL,1.90±0.27ng/mL,1.76±0.27ng/mL,1.97±0.33ng/mL),差异无统计学意义,但是明显高于假手术对照组(0.88±0.47ng/mL),差异有统计学意义(p<0.05)。结论:(1)人脐带血CD133+细胞可改善HF裸小鼠心肌间质纤维化。(2)CD133+细胞与脐血中其他干细胞组分可能不存在协同作用,但可能存在空间位阻效应。(3)将人脐血干细胞移植给裸小鼠后4周,干细胞并未定植于心脏局部。(4)裸小鼠血清MMP-9浓度不是反映心衰后心肌纤维化程度的灵敏指标。(5)异丙’肾上腺素5mg/Kg/d腹腔注射5天后可制作出可靠的裸小鼠心衰模型。