草鱼(Ctenopharyngodidellus)是我国重要的淡水养殖经济鱼类，也是潮州市的重要水产养殖品种。近几年来，每年8到11月份，潮州市江东镇养殖区的草鱼细菌性败血病病害严重，经济损失较大。为了找到该病的预防和控制方法，本课题组从病原、病因、疫苗研制及其效果评价等方面对草鱼细菌性败血病进行了较系统的研究，主要结果如下：　　一、江东养殖区细菌性败血病爆发的主要原因　　本研究主要从养殖池塘的水质环境和饲养管理等方面探讨细菌性败血病爆发的主要原因。2010年8月到2011年3月的八个月期间，在江东养殖区分别选取有发病史和没发病史的对照池塘各3个，对其发病情况和水质每月进行1-2次监测，检测的水质指标有水温、溶解氧、pH、氨氮、亚硝态氮和无机磷。结果发现：有发病史的池塘8-11月出现了细菌性败血病，无发病史的池塘未发现该疾病；该病的爆发呈现出较明显的季节性变化，在水温较高的8到9月发病严重，一直持续到11月份，在水温较低的12月到次年3月份期间较少发生。与未发病池塘相比，发病池塘在8月和9月份的氨氮含量显著升高(P<0.05)，其中9月份的含量高达1.06mg/L；水体溶解氧在8个月的监测期内均低于未发病池塘；发病池塘的水体pH除9月份高于未发病池塘外，其余月份均低于未发病池塘。发病池塘的亚硝氮含量在10月和11月发病期间处于峰值，其无机磷含量在8－9月低于未发病池塘；发病池塘的蓝藻含量在发病期间较高，微囊藻含量最高。发病池塘的养殖密度较未发病池塘要大，投喂饲料较多。结果说明：养殖池塘的水质恶化与饲养管理欠科学可能是细菌性败血病爆发的重要原因。　　二、细菌性败血病病原的分离鉴定　　从患病草鱼体内分离得到一株优势细菌，在LB培养基和TCBS培养基上的颜色分别为白色和黄色；菌落表面光滑、圆润，为革兰氏阴性菌。细菌的生理生化反应结果与嗜水气单胞菌相同。以该细菌的基因组DNA为模板，以细菌16SrRNA的通用引物P27F和P1492R进行PCR扩增，得到的序列长度为1445bp；将16SrRNA序列进行同源比对和系统发育树分析，发现该菌与嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophila)聚为一个分支，同源性高达99％。抑菌试验结果显示：该菌对8种抗生素的敏感性从强到弱的顺序为：阿莫西林、氟苯尼考、诺氟沙星和甲砜霉素、链霉素、恩诺沙星、磺胺甲恶唑、青霉素钠。即该菌对阿莫西林和氟苯尼考最敏感，对磺胺甲恶唑、青霉素钠不敏感。　　三、灭活疫苗研制及免疫效果评价　　将从患病草鱼体内分离得到的嗜水气单胞菌菌株活化后进行扩大培养，采用福尔马林溶液灭活处理后制成疫苗；然后以该灭活疫苗采用胸鳍基部注射方式对平均体重50±5克的60尾草鱼幼鱼进行免疫接种，实验组每尾注射浓度为1.0×108cfu/mL的灭活疫苗0.3ml，对照组注射等量0.85%的无菌生理盐水。分别于第0，7，14，21，28天抽血取样测定免疫指标变化，并在第28天每尾注射0.3mL浓度为1.0×108cfu/mL的嗜水气单胞菌菌液进行攻毒，然后观测记录实验组和对照组鱼的死亡率，以评估免疫保护效果。结果显示：在接种后的0-28天内，实验组和对照组鱼血清中各项免疫指标的变化范围分别为：溶菌酶活力是36.3-82.5U/mL和36.3-37.1U/mL，超氧化物歧化酶是9.91-20.48U/mL和9.91-14.02U/mL，酸性磷酸酶是45.1-85.3U/100mL和45.1-51.1U/100mL，碱性磷酸酶是19.0-54.0U/100mL和19.0-24.8U/100mL，抗体凝集效价是1:4-1:512和1:4-1:8。攻毒后的12天内，实验组的累积死亡率为26.67%，对照组为93.33%，免疫保护力为71.43%。结果表明：注射嗜水气单胞菌灭活疫苗可明显提高草鱼的免疫力，可有效减少由该细菌引起的死亡率。因此，通过注射灭活疫苗来预防草鱼细菌性败血病是可行的。　　以上结果表明：江东养殖区池塘的水质恶化及饲养管理欠科学是草鱼细菌性败血病爆发的重要原因；嗜水气单胞菌为其主要病原。通过灭活疫苗免疫接种能够提高草鱼的免疫力，降低死亡率。这些研究结果可为草鱼细菌性败血病的防治提供理论基础，对当地养殖业的健康发展具有重要的实际意义。