Hsacirc0000417在HCC中高表达及其功能分析研究

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目的:分析HCC中环状RNA的表达谱及其作用,为肝癌的诊断和治疗提供新的依据。方法:1.收集HCC组织及癌旁非瘤组织(NCMT)39对,从中选取5对均一性高的组织标本,通过circRNA芯片技术筛选出差异性表达最大的环状RNA为hsacirc0000417,并予以qPCR验证其表达。2.扩大样本检测,验证34对肝癌组织及邻近非癌组织中hsacirc0000417的表达,且同时在肝癌细胞株验证。3.构建敲减该环状的病毒,并分别转染人肝癌hepG2、BEL7402细胞。通过平板克隆实验、流式细胞实验、MTT、细胞凋亡实验检测该环状的功能。结果:1.通过circRNA芯片技术,筛选出了在HCC组织中差异性表达的环状RNA有304个,其中表达上调的162个,表达下调的142个,其中hsacirc101099(circABasehsacirc0000417)在肝癌组织中的表达量显著上调约12倍(FC=11.875);qPCR的结果显示,与NCMT相比,HCC中hsacirc0000417的表达上调7.60倍。2.扩大样本量qPCR验证结果显示,hsacirc0000417在人肝癌组织中显著高于邻近癌旁组织,并且在肝癌细胞中也较肝细胞中高表达,差异均具有统计学意义(P<0.05)。3.与对照组相比,转染了敲减该环状病毒的人肝癌细胞hepG2、BEL7402,细胞增殖水平显著下降、G2期阻滞、凋亡率增加(P<0.05)。结论:1.Hsacirc0000417在人肝癌组织及肝癌细胞中显著高表达,其有望成为肝癌预后预测的分子标志物。2.敲减该环状RNA的表达可抑制人肝癌细胞的增殖、促进细胞凋亡、并干扰细胞周期,导致使分裂期(G2期)细胞比例明显增多;可作为靶向治疗的潜在靶点。
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