多通道串联式压电传感器在真菌及尿素酶细菌检出鉴定中的应用研究

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多通道串联式压电传感器(MSPQC)是以串联式压电传感器(SPQC)为基础构建的一种新型生物电化学装置,可以同时检测多个样本且样本之间互不干扰。该传感器对溶液的性质(如电导率、介电常数、粘度、密度以及界面性质等)变化有灵敏的响应。它具有灵敏度高、操作简单、响应谱广、成本低廉等优点而深受广大分析者的欢迎。本论文在本实验室前期工作的基础上,充分利用MSPQC对电参数的响应特性,致力于对改进培养基和引进新的电极,解决了传感器对真菌检测的局限性及传感器的金属电极在溶液中易轻微腐蚀等问题,拓宽了MSPQC传感器在临床中的应用范围,鉴于此开展了以下研究工作:1.构建了一种聚吡咯分子导线压电尿素酶传感器用于检测尿素酶细菌。在构建的传感器中将聚吡咯化学沉积于聚酰亚胺薄膜上,作为探针取代串联式压电传感器中的金属电极。这种电极避免了与溶液的直接接触,克服了SPQC中金属电极在液相中因腐蚀易引起响应噪音的缺点。构建的传感器对尿素酶细菌有灵敏的响应是基于以下原理:尿素酶细菌在生长代谢过程产生的氨气可与聚吡咯膜发生反应,从而引起聚酰亚胺-聚吡咯膜的电导发生变化,这种变化能被传感器灵敏地检测到。与SPQC相比,聚吡咯分子导线压电尿素酶传感器具有快速、响应灵敏、性能稳定、不受培养基背景电导影响等优势。2.提出了一种基于MSPQC法特异性检测真菌的新培养基。真菌在这种培养基中生长消耗酒石酸铵培养基中的铵根离子,同时产生氢离子。氢离子与酒石酸根离子反应,生成一价的酒石酸根离子或酒石酸铵使得溶液中阴离子总数减小,导致电导降低,在MSPQC上得到优良的响应信号。而其他临床常见细菌如大肠杆菌、绿脓假单胞菌以及金黄色葡萄球菌在这种方法中的得到的响应信号很小,与空白对照曲线相近。因此这种方法对真菌的检出具有特异性。相对于实验室常用的YC培养基,新培养基用于检测真菌的方法还具有以下优势:(1)培养基成分简单,不需要调节pH值,配置简单方便;(2)响应信号明显,频移大;(3)检测时间短。3.利用MSPQC法,结合海藻糖培养基与酒石酸铵培养基达到鉴定白色念球菌的目的。由前文可以得知,酒石酸铵培养基可以特异性的检测出包括白色念球菌在内的临床常见真菌,如热带念球菌、罗伦氏隐球菌、近平滑念球菌、无名假丝酵母。而临床常见的这几种真菌中仅白色念球菌在所配置的海藻糖培养基中响应信号很小,基本上没有明显的频移。因此利用这两种培养基可以把白色念球菌同其他临床常见真菌及细菌区分开来,达到鉴定白色念球菌的目的。
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