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随着人民生活水平的不断提高,越来越多的人开始追求高质量的生活,并开始关注膳食的安全,鱼虾类等水产品中因富含各种营养物质(如蛋白质、氨基酸、脂肪酸等)而深受广大消费者青睐。近年来,由于食品安全问题时有发生,水产品质量安全也引起了广泛的关注。如水产品中存在的一些硝基呋喃类药物超标事件,其诱因是硝基呋喃类药物被作为抗生素用于水产养殖中。而硝基呋喃类药物具有潜在的“三致”作用,会严重损害养殖动物的生长发育和健康。因此,急需对此类药物在水产品的代谢残留进行监测。本课题以鲫鱼为研究对象,建立了鲫鱼肌肉及各内脏组织中呋喃西林代谢物氨基脲(SEM)的超高效液相色谱串联-质谱(UPLC-MS/MS)检测方法,旨在探究呋喃西林(NFZ)原药在鲫鱼体内各组织的蓄积分布与消除规律,并对呋喃西林原药中微量呋喃唑酮的含量进行分析,主要研究内容如下:(1)建立了UPLC-MS/MS测定鲫鱼中呋喃西林代谢物残留量的方法。研究使用2-硝基苯甲醛进行衍生、乙酸乙酯进行提取,优化了前处理除脂净化方法,采用多反应监测模式对硝基呋喃类代谢物的衍生物进行监测,三重四级杆质谱测定。结果显示:本方法对呋喃西林代谢物的测定在0.51000 ng/mL线性范围内线性关系良好(R2=0.9998);在5、10、100μg/kg三个水平下平均加标回收率为82.5%104%,RSD为2%8%。实验结果表明所建立的UPLC-MS/MS分析方法具有特异性强、样品前处理简单等特点,可快速、准确地测定鲫鱼体内的呋喃西林代谢物残留量,为鲫鱼等水产品中氨基脲的检测提供科学依据。(2)以鲫鱼为研究对象,采用药浴方式饲养鲫鱼,使NFZ原药在其体内代谢蓄积,并分析测定其体内不同组织中SEM的含量。结果发现:SEM在鲫鱼体内各组织样品中的残留量均呈现相似的增长趋势,SEM浓度均随着蓄积时间增加而逐渐增高,但由于各组织基质不同,增长速率也有所不同,其中胆和脾脏的SEM质量浓度均高于其他组织,在药浴144 h时,鲫鱼体内各组织中的SEM质量浓度顺序由大到小为:胆>脾>肝脏>鳃>肾脏>肠>脑>肌肉。在鲫鱼的消除试验结果分析可知,各内脏组织的药时曲线均呈现先增高到峰值再降低的趋势,且在24 h达到药物峰值浓度,其中胆的消除速率高于其他组织且最高达到7.4μg·(kg·h)-1。在代谢336 h,测得各组织SEM残留量依次为:胆>脾>肠>肝>鳃>鱼头>肌肉。其中肌肉中SEM残留量最低为2.07μg/kg,药物浓度仍高于法定的检出限(1μg/kg)。实验中在鲫鱼的内脏和肌肉中还检测出微量的呋喃唑酮(FZD)代谢物AOZ,因此接着对AOZ的实际来源进行相关探讨与试验,首先对SEM是否会转化为AOZ进行了理论分析,通过NFZ原药及其标准品药浴鲫鱼的实验设计发现,在NFZ标准品药浴的鲫鱼体内未发现AOZ,而NFZ原药药浴的鲫鱼体内检测到少量的AOZ,因此确定SEM不会转化为AOZ,并确定NFZ原药中含有少量的呋喃唑酮。除此之外,还对不同给药方式(注射和药浴)进行比较,发现直接注射可能对鲫鱼存活率产生较大影响,因此采用药浴方式进行渗透给药。(3)基于前一章NFZ原药药浴鲫鱼实验检测到AOZ的值,为了探究呋喃西林原药中呋喃唑酮的含量,首先设计了5组呋喃西林与呋喃唑酮标准品的混标比例为(99.8:0.2;99.5:0.5;99:1;98:2)并与同浓度的呋喃西林原药进行比较,经UPLC-UV检测比较紫外图谱发现混标中FZD有少量被检出,但是原药未检出FZD,分析原因为FZD的含量太低,且低于UPLC-UV检测方法的检出限,因此,在鲫鱼药浴代谢的实验基础上,设计了5μg/mL的呋喃西林原药和四种不同比例的NFZ与FZD混标对鲫鱼药浴实验,采用UPLC-MS/MS法对五组药浴的鲫鱼肌肉和内脏中的AOZ与SEM进行检测分析,结果显示:在呋喃西林原药药浴的鲫鱼肌肉和内脏中测得AOZ的浓度分别为0.16±0.1μg/kg和6.6±0.16μg/kg,利用测得的各组肌肉和内脏中AOZ浓度计算出呋喃西林原药中NFZ/FZD分别为99.938/0.062和99.974/0.026。