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汉滩病毒是汉坦病毒属中的一个成员，感染其天然宿主条纹姬鼠后引起慢性无症状感染。然而，汉滩病毒感染人类引起以发热、出血、低血压和肾衰竭为典型临床特征的急性传染病-肾综合征出血热。全世界每年肾综合征出血热发病人数达10万左右，其中70～90%病例发生在中国，死亡率达0.1%-15%。肾综合征出血热疾病过程中有五个典型临床分期：发热期、休克期、少尿期、多尿期和恢复期。肾综合征出血热的基本病理改变为全身小血管和毛细血管广泛损害、通透性增加，然而其致病机制至今仍未阐明。汉滩病毒引起的肾综合征出血热是一个多因素参与的过程，汉坦病毒感染宿主细胞导致的直接损伤以及病毒感染后引起的免疫病理损伤可能在全身小血管和毛细血管广泛损害中共同发挥作用，病毒感染直接作用包括改变内皮细胞的运动能力和通透性以及病毒影响机体的固有免疫应答，病毒感染引起机体的免疫应答包括免疫复合物沉积、补体激活、体液和T细胞免疫应答以及病毒感染诱导细胞释放炎症因子等。除汉滩病毒外，其他病毒如汉城病毒、多普拉病毒、阿穆尔河病毒以及普马拉病毒感染人类也能引起肾综合征出血热。最近有一些研究表明汉坦病毒属中的多普拉病毒、普马拉病毒RNA载量与病情严重程度有相关性，然而至今没有汉滩病毒检测的商品化试剂盒，也未见有汉滩病毒引起的肾综合征出血热病毒载量与疾病严重程度及病理损伤关系的研究。血浆细胞外游离DNA（cf-DNA）是存在于血浆中的细胞外双链DNA，主要来源于凋亡和坏死细胞，反应了机体受损程度，在多种急性和慢性疾病中升高并与疾病严重程度相关。最近研究表明，血浆cf-DNA在登革热以及普马拉病毒引起的肾综合征出血热等疾病中升高且与疾病严重程度相关。然而至今未见有汉滩病毒引起的肾综合征出血热患者血浆cf-DNA的动态变化规律及其与疾病严重程度相关性的研究。本研究通过一步法实时定量RT-PCR方法检测2009～2011年第四军医大学唐都医院传染科101例患者的198份血浆标本的病毒载量，通过荧光染色法检测患者血浆标本的cf-DNA水平，通过捕获法ELISA检测患者血清中抗汉滩病毒核蛋白的IgM和IgG的效价，并分别分析了患者血浆病毒载量和血浆cf-DNA与患者血小板计数、肌酐、白细胞计数之间的相关性，患者血浆病毒载量和血浆cf-DNA之间的相关性，以及血浆病毒载量和血清IgM和IgG的效价之间的相关性。（1）建立了检测汉滩病毒载量的一步法实时定量RT-PCR方法，检测灵敏度为2700copies/mL血浆，该方法特异性良好，汉城病毒L99株和常见病毒HBV、HCV、流感病毒不会引起假阳性，批内差异和批间差异分别为：0.6%～4.5%和3.9%～7.3%，重复性好。（2）检测了2009～2011年唐都医院住院101例HFRS患者（男78例，女23例，年龄跨度9～73岁）198份血浆标本的病毒载量和其中有两个病期以上患者170份血浆标本的cf-DNA水平：①提取患者血浆标本RNA后用建立的一步法实时定量RT-PCR检测病毒载量，79例患者的84份标本能检测到病毒，病毒载量为3.43～7.33log10copies/mL。②患者血浆直接荧光染色法检测均能检测到cf-DNA的存在，浓度范围为：832～41400ng/mL。（3）依据临床症状和实验室检测指标将患者分为轻型/中型和重型/危重型两组，分别分析了肾综合征出血热患者血浆病毒载量和血浆cf-DNA与病程、病情和病情指标之间的相关性，患者血浆病毒载量和血浆cf-DNA之间的相关性，以及血浆病毒载量和血清IgM和IgG的效价之间的相关性，发现：①汉滩病毒载量在发热期、低血压休克期明显升高，随病程进展到少尿期迅速下降，多尿期与恢复期检测不到病毒载量，这与汉滩病毒感染的重要特征-自限性一致。②疾病早期重型/危重型患者血浆病毒载量高于轻型/中型患者(分别为5.90和5.03log10copies/mL; P=0.001)，患者发热期/休克期病毒载量与血小板计数最低值呈负相关，与肌酐最高值呈正相关，提示汉滩病毒感染病毒载量与疾病严重程度相关。③用GST捕获法检测患者血清IgM、IgG的效价，并分析了患者发热期/休克期病毒载量与患者血清特异性IgM和IgG效价的峰值的相关性，没有发现明显相关性。④患者血浆cf-DNA疾病早期升高，病程进展至多尿期cf-DNA下降至正常水平。⑤疾病早期重型/危重型患者血浆cf-DNA高于轻型/中型患者（3664vs.2060ng/mL，P=0.007），患者发热期/休克期血浆cf-DNA与白细胞计数最高值呈正相关，与血小板计数最低值呈负相关，与肌酐最高值呈正相关，提示汉滩病毒感染后血浆cf-DNA水平与疾病严重程度相关。⑥患者血浆cf-DNA与血浆病毒载量明显正相关(P<0.001； r=0.68)，提示汉滩病毒感染后引起的细胞的坏死或凋亡可能参与疾病的病理损伤。本研究首次系统检测汉滩病毒引起的肾综合征出血热患者血浆病毒载量和血浆cf-DNA水平，并分别分析了病毒载量和血浆cf-DNA与病程、病情之间的相关性，患者血浆病毒载量和血浆cf-DNA之间的相关性，以及血浆病毒载量和血清IgM和IgG的效价之间的相关性，结果表明：汉滩病毒引起的肾综合征出血热患者发热期/休克期血浆病毒载量和血浆cf-DNA与疾病严重程度相关，可以作为预测疾病预后的指标，明确了汉滩病毒载量和血浆cf-DNA在肾综合征出血热中的变化规律，并为研究汉滩病毒在肾综合征出血热致病机制中的作用提供理论和实验依据。