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目的:探讨靶向Bcl-w基因miR-195对BEL-7402/5-FU细胞5-氟尿嘧啶敏感性的影响及其作用机制。方法:MicroRNA(miRNA)芯片分析BEL-7402和BEL-7402/5-FU细胞miRNA的表达差异。靶基因预测软件分析与Bcl-w基因相互作用的miRNA,通过以上两种方法结果的比对,筛选出miR-195为目的miRNA。将miR-195s质粒载体和Anti- miR-195(miR-195a)分别瞬时转染至BEL-7402和BEL-7402/5-FU细胞;荧光素酶报告基因实验验证miR-195调控的靶基因;倒置荧光显微镜和实时定量RT-PCR检测转染效率;MTT、流式细胞术检测细胞药物敏感性;实时定量RT-PCR检测mRNA水平,Western blot检测蛋白表达水平。结果:基因芯片检测结果表明BEL-7402/5-FU比BEL-7402上调两倍的miRNA有:miR-192和miR-194;下调两倍的miRNA有:miR-195,miR-18a, miR-429等44个;利用生物信息学筛选出miR-195作为研究对象;倒置荧光显微镜和实时定量RT-PCR检测,结果表明在miR-195s转染的BEL-7402/5-FU细胞中miR-195表达水平显著升高,miR-195a转染的BEL-7402细胞中miR-195表达水平显著降低;MTT检测,结果显示miR-195s转染组的细胞生长抑制率较miRNA阴性对照组和未转染对照组明显增高;流式细胞仪检测,miR-195s转染组凋亡率较miRNA阴性对照组和未转染组增加;实时定量RT-PCR检测表明,miR-195s转染组较miRNA阴性对照组和未转染组Bcl-w的mRNA表达水平降低;Western blot检测,Bax蛋白表达水平升高,Bcl-w、Bcl-XL、Bcl-2蛋白表达水平降低。结论:1、miR-195能够增加BEL-7402及BEL-7402/5-FU细胞对5-FU的药物敏感性,促进细胞凋亡。2、miR-195能够上调Bax蛋白的表达,下调Bcl-w、Bcl-XL、Bcl-2蛋白表达。3、miR-195可能通过靶向调控Bcl-w基因增加肝癌细胞对5-FU的药物敏感性。