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目的探讨Nod样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体在大肠杆菌(大肠埃希菌)血流感染中的免疫反应机制。方法(1)将大肠杆菌标准株(ATCC 25922)接种在血琼脂平板后挑取单个菌落转移到LB液体培养基中,37℃摇菌12 h,菌液离心后重悬于PBS中,菌液稀释至2×10~9cfu/m L作为最适感染浓度。(2)对C57BL/6小鼠经尾静脉注射大肠杆菌作为感染组,经尾静脉注射磷酸盐缓冲液(PBS)作为对照组,分别于24 h和48 h分别安乐死处死感染组小鼠,在实验开始时即安乐死处死对照组小鼠。(3)用匀浆器分别研磨小鼠的肝、肾、肺组织成组织匀浆,通过ELISA法分别检测各组小鼠血清及肺、肾、肝组织匀浆中IL-1Β及IL-18的含量。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组小鼠肝、肾、肺组织中NLRP3、ASC、caspase-1 mRNA的表达。Western blot法分别检测NLRP3、ASC、caspase-1 p20蛋白在小鼠肝、肾、肺中的表达水平。HE染色评估肝、肾、肺组织的炎症。结果大肠杆菌感染后24 h组和48 h组小鼠组织HE染色可见大量炎症细胞浸润和组织坏死;在血流感染组中所有组织匀浆及血清中白介素1β(IL-1β)及白介素18(IL-18)等细胞因子均增多;肝肺组织匀浆中NLRP3、含CRAD结构域的凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(caspase-1)mRNA表达量在感染后24 h表现为明显升高,与肝肺组织不同的是,肾组织匀浆中NLRP3、ASC、caspase-1 mRNA在感染后48 h表现为明显升高;肝、肺、肾组织中NLRP3蛋白、ASC蛋白在48 h组中表达量比在24 h组中表达量要明显升高,而pro-caspase-1在肝肾组织中3组表达量没有明显区别,caspase-1蛋白在肺肾组织中表达量随时间推移表达量上升。结论大肠杆菌血流感染与NLRP3炎症小体的激活有关,并且NLRP3炎症小体的表达水平与感染的严重程度有关,随着感染的加重,NLRP3炎症小体的表达量增加。此项研究结果可能为大肠杆菌血流感染导致的脓毒症的治疗提供一个新的思路。