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目的：探讨TritonX-100促进脂质体介导的基因转染大鼠骨髓间充质干细胞的作用及TritonX-100对大鼠骨髓间充质干细胞活性的影响。方法：1、Wistar大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的取材和培养。2、用质粒转化DH5a大肠杆菌法扩增构建质粒pegfp-BMP2-N1, pegfp-VEGF165-N1。3、通过噻唑蓝MTT法,在酶联免疫检测仪上测得492nm波长处的吸光度(OD)值,确定TritonX-100用于促进脂质体介导基因转染的最佳浓度。4、在Triton X-100适宜浓度下,脂质体介导BMP2与VEGF165转染骨髓间充质干细胞。实验分为7组：细胞空白组、BMP2常规转染组、VEGF165常规转染组、BMP2实验组、VEGF165实验组、BMP2无脂质体组、VEGF165无脂质体组。细胞空白组为骨髓间充质干细胞,只含无血清培养基；BMP2与VEGF165常规转染组,按Lipofect2000步骤进行转染；VEGF165与BMP2实验组,在脂质体复合物滴加到培养孔中混匀后,加入适宜浓度的X-100混匀,其余步骤同常规转染组；BMP2与VEGF165无脂质体组,不加脂质体Lipofect2000,只加入适宜浓度的Triton X-100和无血清培养基。5、在转染48小时后,用倒置荧光显微镜观察实验组及对照组中荧光蛋白的表达情况。6、转染72h后,做实时荧光定量PCR,主要检测各组中BMP2和VEGF165在转染72h后表达水平的相对差异。本试验采用相对定量2-△△Ct法来检验基因的表达变化。7、实验数据常规进行方差齐性检验、正态性检验。采用t检验比较单变量两组资料,单因素方差分析比较多组资料,非参数检验比较方差不齐者,计数资料采用卡方检验,以P<0.05为差别有统计学意义。采用SPSS12.0统计软件处理分析。结果：1、Triton X-100用于促进脂质体介导基因转染的最佳浓度为0.01%,经MTT法测得的OD值为0.127,与空白细胞OD值0.151相比,P<0.05,无统计学意义,说明在这个浓度下,Triton X-100对细胞的生长没有影响。2、转染转染48h后,在置荧光显微镜下观察到BMP2、VEGF165常规转染组和BMP2、VEGF165实验组有荧光表达,而细胞空白组和BMP2、VEGF无脂质体组无荧光蛋白的表达,倒置显微镜观察,常规转染组与实验组的荧光表达的数量有差别。3、转染72h后,实验组BMP2的相对表达量5.94,常规转染组为4.99,其转染效率提高了19%；实验组VEGF165的相对表达量3.48,常规转染组为2.77,其转染效率提高了25.6%。实验组与常规转染组的BMP2与VEGF165表达水平有差异(P<0.05)。结论：1、Triton X-100用于促进脂质体介导基因转染的最适浓度为0.01%,在这个浓度下,Triton X-100对细胞的生长没有影响。2、TritonX-100可以促进脂质体介导基因转染大鼠骨髓间充质干细胞,提高其19%-25.6%的转染效率。3、Triton X-100促进脂质体介导基因转染大鼠骨髓间充质干细胞的原因可能是由于Triton X-100有溶解脂质体与细胞膜上的脂类物质的能力,从而促进脂质体-DNA复合物被细胞内吞或直接因膜之间的融合而转染进细胞。