【摘 要】
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摇瓶培养重组毕赤酵母诱导表达重组人血清白蛋白(recombinant human serum albumin,rHSA)至胞外,经优化培养pH值和碳源,表达量升高到200mg/L.发酵液冷冻离心后,其上清液经硫
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摇瓶培养重组毕赤酵母诱导表达重组人血清白蛋白(recombinant human serum albumin,rHSA)至胞外,经优化培养pH值和碳源,表达量升高到200mg/L.发酵液冷冻离心后,其上清液经硫酸铵分级沉淀、离子交换层析、疏水层析和凝胶过滤获得纯度较高的rHSA为单一条带.大规模高密度培养研究表明,采用无机盐培养基、流加甘油培养工艺,重组毕赤酵母培养液密度可达400g(wet cells)/L;流加甲醇诱导表达的rHSA为1.5g/L;发酵液冷冻离心后,其上清液经超滤、离子交换层析、疏水层析、凝胶过滤,分离纯化得rHSA目的蛋白,纯化的样品再用SDS-PAGE、高效液相、Western blotting等方法鉴定,结果显示rHSA含量大于90﹪,分子量和抗原性与人源HSA相同.
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