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研究目的本研究通过检测肝癌临床标本中ANRIL的表达水平,同时研究肝癌患者的临床病理特点和预后与ANRIL的表达水平之间的关系;最后通过体外实验,探讨ANRIL对肝癌细胞株HepG2增殖、迁移及侵袭等生物学行为的影响。研究方法所选90例标本均来自于江苏大学附属武进医院肝胆外科、苏州大学附属第三医院肝胆外科、江苏省人民医院肝脏外科2009年1月1日至2012年1月1日行肝细胞癌手术时患者的肝癌组织标本及其相应的癌旁组织标本,应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)来检测肝癌患者ANRIL表达水平,同时研究患者临床病理资料寻找其与ANRIL之间的联系。应用Fisher精确概率法来研究ANRIL表达和患者临床特征的相关性,Kaplan-Meier法绘制患者的生存曲线,应用多因素COX回归分析来研究患者各种临床资料与预后之间的联系。我们将ANRIL-si RNA,Control-siRNA转染至HepG2肝癌细胞中,应用qRT-PCR检测肝癌细胞株HepG2中ANRIL表达水平,应用MTT实验及克隆形成实验来研究肝癌细胞株HepG2的增殖能力,应用划痕实验及Transwell迁移实验来研究肝癌细胞株HepG2体外迁移能力,使用Transwell侵袭实验来检测肝癌细胞株HepG2体外侵袭能力。研究结果1.qRT-PCR结果显示肝癌患者肿瘤标本中的ANRIL表达水平明显高于癌旁正常组织(P<0.05)。2.相关性分析结果显示ANRIL表达量与肝癌TNM分期(?~2=43.245,P<0.05)及病理分级(?~2=40.724,P<0.05)具有相关性,而与患者年龄、性别、乙肝表面抗原、甲胎蛋白及肿瘤大小无明显相关(均P>0.05)。3.Kaplan-Meier分析显示ANRIL高表达组病人的平均生存期明显低于ANRIL低表达组,差异具有显著性(P<0.05)。通过单因素分析发现,年龄、TNM分期、病理分级及ANRIL表达量与肝癌患者生存率密切相关;进一步多因素回归分析显示,仅TNM分期、病理分级及ANRILN表达量是肝癌患者预后的独立影响因素。4.qRT-PCR结果显示si-ANRIL能够有效的促使肝癌细胞株HepG2低表达ANRIL。5.MTT实验及克隆形成实验结果显示降低ANRIL表达能够抑制肝癌细胞株HepG2的增殖能力(P<0.05)。6.划痕实验及细胞侵袭迁移实验结果显示低表达ANRIL后肝癌细胞株HepG2的迁移和侵袭能力明显降低(P<0.05)。研究结论ANRIL在肝癌中高表达,且与肝癌TNM分期、病理分级及肝癌患者预后有着密切相关,是肝癌患者的独立预后影响因素。ANRIL能够明显促进肝癌细胞株HepG2的增殖、迁移、侵袭能力,提示其在肝癌发生发展中发挥重要作用,我们可以以此作为肝癌靶向治疗的分子基础进行进一步研究,为治疗肝癌提供一个新的途径,从而有可能会推动我国防治肝癌的临床工作,提高我国防治肝癌的水平,减少肝癌的死亡率,提高肝癌的治疗效果。