【摘 要】
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目的:探究miR-126前体及抑制剂、甲基化酶抑制剂对T淋巴细胞和大鼠模型miR-126表达、Th相关因子表达及细胞亚群分化的调控作用。方法:1)利用miR-126前体和抑制剂干预Jurkat细胞和大鼠模型,RT-q PCR和WB检测miR-126表达和Th细胞相关因子m RNA及蛋白表达情况;ELISA检测大鼠血清Ig E水平;流式细胞术检测大鼠Th细胞亚群分化比例。2)5-aza干预Juaka
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目的:探究miR-126前体及抑制剂、甲基化酶抑制剂对T淋巴细胞和大鼠模型miR-126表达、Th相关因子表达及细胞亚群分化的调控作用。方法:1)利用miR-126前体和抑制剂干预Jurkat细胞和大鼠模型,RT-q PCR和WB检测miR-126表达和Th细胞相关因子m RNA及蛋白表达情况;ELISA检测大鼠血清Ig E水平;流式细胞术检测大鼠Th细胞亚群分化比例。2)5-aza干预Juakat细胞和大鼠模型,CCK-8法检测细胞活性;RT-q PCR、WB和流式细胞术检测miR-126表达和Th细胞相关因子m RNA、蛋白表达情况以及Th细胞亚群的分化比例;ELISA检测大鼠血清因子水平。结果:1)miR-126转染Jurkat细胞和大鼠后,miR-126基因在模拟物组表达升高（P＜0.01）,在抑制剂组表达降低（P＜0.01）;AR大鼠Ig E水平升高（P＜0.01）;miR-126基因表达升高（P＜0.01）;IFN-γ、IL-4、GATA3和ROR-γ因子表达升高（P＜0.01）,Foxp3因子表达降低（P＜0.01）。Th1和Th2细胞亚群数目在miR-126模拟物组减少,在抑制剂组中数目增多;Treg细胞亚群数目在miR-126模拟物组增多,在抑制剂组中数目减少。2)CCK-8结果显示细胞抑制率随5-aza浓度增大及作用时间延长呈递增趋势（P＜0.01）;5-aza干预后miR-126基因表达降低（P＜0.01）、GATA3和Foxp3表达升高（P＜0.01）;Th2和Treg细胞亚群在5-aza干预后数目增多。AR大鼠miR-126基因在5-aza干预后表达降低（P＜0.01）。AR大鼠IFN-γ、IL-4、GATA3和ROR-γ表达升高（P＜0.01）,5-aza干预后表达降低（P＜0.01）;AR大鼠Foxp3表达降低（P＜0.01）,5-aza干预后表达升高（P＜0.01）;Th1、Th2和Th17细胞亚群数目在AR组中增多,在5-aza干预后数目降低。结论:AR中Ig E水平升高,miR-126表达升高,甲基化酶抑制剂可以调控miR-126表达;miR-126和甲基化酶抑制剂可以调控Th细胞因子表达以及Th细胞亚群分化;Th1、Th2和Th17细胞因子的表达升高以及Treg细胞因子的表达降低与AR发生发展有关。
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