【摘 要】
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该工作通过一系列克隆的亚克隆方法,构建了植物表达载体pGBI4ABbar.pdM302的约0.6kb的patⅠ-SacⅠ限制片段为bar基因的编码区,切下后克隆到了pG4AB的pstⅠ和SacⅠ之间,得到重
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该工作通过一系列克隆的亚克隆方法,构建了植物表达载体pGBI4ABbar.pdM302的约0.6kb的patⅠ-SacⅠ限制片段为bar基因的编码区,切下后克隆到了pG4AB的pstⅠ和SacⅠ之间,得到重组质粒pG4Abar.pG4Abar经HinkⅢ酶切后,用T<,4>聚合酶处理,获重组质粒pG4ABar.通过Sanger双脱氧-puc体系序列分析法证实了bar基因保留了其正确的阅读框架.最终从pG4ABar上切下约1.6kb的HinkⅢ片段,通过人工合成的接头,克隆到了pGⅠ4AB的EcoRⅠ大片段上而获得了含B.t.和bar的双基因植物表达载体pGBⅠ4ABbar,为进一步的植物转化工作打下了基础.
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