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目的：初步探讨miR19a靶向作用TP53INP1介导结肠癌细胞HCT8对5-Fu耐药的机制研究。方法：1、收集结肠癌患者的石蜡标本，利用microRNA（miRNA）芯片检测石蜡包埋的肿瘤组织及其相对应的邻近癌旁组织差异表达的miRNAs。2、采用逐步递增药物浓度的方法，诱导筛选人结肠癌HCT8的5-Fu耐药细胞株HCT8/5-Fu，MTT法确定HCT8/5-Fu耐药细胞相对于其亲本细胞HCT8细胞的耐药性和耐药倍数。3、利用qRT-PCR检测5-Fu耐药细胞株HCT8/5-Fu及敏感株HCT8中miR19a的表达。4、转染miR19a mimic（mi）和miR19a negative control（mi-NC）至HCT8细胞，利用MTT法检测miR19a对细胞5-Fu药物敏感性的影响。5、以miR19a为检索词，利用数据库TargetScan和Pictar对miR19a的靶基因进行预测，取交集获得与肿瘤耐药相关的基因，通过查阅文献，初步候选TP53INP1作为miR19a的靶基因进行研究。利用双荧光素酶报告基因检测进行鉴定。6、转染miR19a mimic（mi）和miR19a negative control（mi-NC）至HCT8细胞，利用Western blot检测miR19a对TP53INP1蛋白表达的影响。结果：1、miRNA芯片结果显示：miR19a在结肠癌患者的肿瘤组织标本中的表达高于邻近癌旁组织（p<0.05）。2、MTT检测结果显示：结肠癌5-Fu耐药细胞株HCT8/5-Fu相对于其亲本细胞HCT8对5-Fu的耐药倍数为18.2倍（p<0.05）。3、qRT-PCR结果显示：耐药细胞株HCT8/5-Fu中miR19a的表达量是敏感细胞株HCT8的7.12倍，其表达量显著高于敏感细胞株HCT8的表达量（p<0.05）。4、MTT检测结果显示：与转染mi-NC组相比，转染miR19a mimic后的HCT8细胞在5-Fu中的半数抑制浓度明显高于mi-NC组的细胞（p<0.05）。5、双荧光素酶报告基因检测结果显示：miR19a mimic显著降野生型TP53INP13’-UTR的荧光素酶活性，说明miR19a与TP53INP1基因3’UTR结合，从而抑制了荧光素酶的活性（p<0.01）。6、Western blot结果显示：与转染mi19a-NC组相比，转染mi19a mimic后的HCT8细胞中的TP53INP1蛋白明显下调（p<0.05），说明miR19a能下调TP53INP1蛋白的表达。结论：1、miR19a的表达与结肠癌细胞HCT8对5-Fu耐药相关。2、miR19a可能通过靶向作用于TP53INP1介导结肠癌细胞HCT8对5-Fu耐药。