【摘 要】
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目的:研究靶向阻断免疫检查点分子CEACAM1对小鼠颅内胶质瘤增殖及机体抗肿瘤免疫能力的影响。方法:利用携带荧光素酶基因及嘌呤霉素抗性的慢病毒转染小鼠胶质瘤细胞系GL261,
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目的:研究靶向阻断免疫检查点分子CEACAM1对小鼠颅内胶质瘤增殖及机体抗肿瘤免疫能力的影响。方法:利用携带荧光素酶基因及嘌呤霉素抗性的慢病毒转染小鼠胶质瘤细胞系GL261,经嘌呤霉素筛选,稳定传代后,采用立体定向技术将肿瘤细胞植入C57BL/6小鼠大脑右侧尾状核,构建小鼠颅内胶质瘤模型;随后利用小动物活体成像技术观察小鼠成瘤情况,将成瘤小鼠按瘤体大小平均分为治疗组和对照组,分别给予腹腔注射抗CEACAM1单克隆抗体或等量无菌PBS,活体成像观察对小鼠颅内胶质瘤生长的影响,记录生存期、绘制生存曲线;收集肿瘤、脾脏、外周血,肿瘤组织行HE染色,免疫组化检测增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,流式细胞术检测脾脏中CD8+T细胞的水平,ELISA法检测小鼠外周血TGF-β的水平。结果:1、经过嘌呤霉素筛选的GL261小鼠胶质瘤细胞,细胞形态正常,生长状态良好;2、小鼠颅内胶质瘤模型构建成功,成瘤率达80%;3、治疗组小鼠颅内肿瘤平均体积为0.125±0.009cm3,对照组为0.361±0.0017cm3;4、治疗组小鼠平均生存期55.1±3.8d,对照组小鼠平均生存期34.7±2.6d;5、肿瘤HE染色证实为胶质瘤,其生长特性及病理特征与人脑胶质瘤相似;6、免疫组织化学结果显示,治疗组PCNA表达减少,对照组表达增加;7、流式细胞术结果显示治疗组小鼠脾脏中CD8+T细胞数量增加;8、ELISA结果表明治疗组小鼠血清TGF-β水平显著低于对照组。结论:小鼠颅内胶质瘤模型的生长特性及病理特征与人脑胶质瘤相似,可最大限度模拟人脑胶质瘤的肿瘤微环境和免疫学特性;靶向阻断CEACAM1可以明显抑制小鼠颅内胶质瘤的生长,并且提高机体抗肿瘤免疫能力。
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