干酪乳杆菌降解发酵香肠肌肉蛋白质的作用及其蛋白酶的纯化和鉴定

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该研究旨在:(1)探讨干酪乳杆菌蛋白酶在发酵香肠肌肉蛋白质降解中的作用;(2)对干酪乳杆菌蛋白酶进行纯化并鉴定其动力学性质;(3)为调控发酵香肠成熟过程和提高产品质量提供理论依据.1.按同样的配方和工艺条件生产两组发酵香肠,一组自然发酵(对照组),另一组以干酪乳杆菌(Lactobacillus casei,Lc)6033作为发酵剂(菌种组).在发酵和成熟期间定时取样,分别测定和观察颜色指标、pH值、Aw值、游离氨基酸、肽、微生物以及肌肉超微结构的变化.2.干酪乳杆菌6033蛋白酶液按5%的比例分别加入肌浆蛋白提取液和肌原纤维蛋白提取液,然后设定不同的pH值,于l 5℃培养7天,定时取样,测定反应后的pH值、十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测蛋白质的变化.3.干酪乳杆菌6033经增菌培养、超声波破碎、高速冷冻离心后获得粗酶液.粗酶液经硫酸铵分级沉淀后,分别进行阴离子交换层析、疏水层析、分子筛层析,最终获得一种电泳纯的蛋白酶.
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