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目的：研究甲基莲心碱(Nef)与伊马替尼(Imatinib)对慢性粒细胞白血病(Chronic myeloid leukemia，CML)原代细胞PI3K/AKT通道的影响，进一步探讨Nef增强Imatinib对CML原代细胞敏感性的作用机制，奠定Nef作为增敏剂的药理基础，为CML临床治疗提供新思路。 方法：①采用逆转录实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测PI3K/AKT通路上游主要基因(bcr/abl、PTEN与SHIP)、通路中重要信号分子(PI3K与Akt)以及下游分子(mTOR与Bel-2家族)基因表达水平。②蛋白质免疫印迹(Western-Blotting)法检测PI3K/AKT通路关键中枢基因Akt总蛋白和磷酸化蛋白(p-Akt)相对表达水平。 结果：⑴Nef与Imatinib分别能下调PI3K/AKT通路上游bcr/abl mRNA表达水平，二者联合下调更明显（P＜0.01）。⑵Nef(4μM)组除外，负调控基因PTEN在单药组和联合组中mRNA表达水平较control组高。Nef(4μM)与Imatinib联合后较Imatinib单药组显著上调该基因mRNA表达水平(P＜0.05），而Nef(8μM)联合组上调更明显(P＜0.01)。⑶与control组比较，SHIP-1 mRNA在各组中表达无统计学意义(P＞0.05)，而SHIP-2基因在单药组和联合组中mRNA表达水平均比control组高且有显著差异(P＜0.05)。Nef(8μM)组、Nef(4μM）与Imatinib联合组、Nef(8μ M)与Imatinib联合组均较Imatinib单药组显著上调SHIP-2 mRNA表达水平(P＜0.05)。⑷相关性分析显示:bcr/abl与PTEN和SHIP-2 mRNA表达水平呈直线负相关(Pearson相关系数分别为:R=-0.708，P＜0.01;R=-0.586，P＜0.01)。⑸Nef与Imatinib对通路中PIK3 CA mRNA与Akt mRNA表达水平无显著影响，对Akt总蛋白表达水平也无显著影响（P＞0.05）。但除Nef(4μM)组以外，各单药组与联合组中p-Akt蛋白表达水平均比control组低(P＜0.01);而联合组P-Akt蛋白表达水平较Imatinib单药组降低更明显（P＜0.05）。⑹Nef对通路中mTOR mRNA表达水平无显著影响(P＞0.05)，但与Imatinib联合后该基因表达水平显著下调(P＜0.05)。⑺Nef对通路下游Bcl-2家族成员Bcl-2 mRNA和Bcl-xL mRNA表达水平无显著影响(P＞0.05);但与Imatinib联合能显著下调两基因mRNA表达水平(P＜0.01)。⑻家族中另一成员Bax基因在各组中mRNA表达水平均较control组高;而Nef(8μM)单药组以及Nef(8μM)与Imatinib联合组较Imatinib单药组显著上调Bax mRNA表达水平(P＜0.05)。⑼Nef可上调Bax/Bcl-2和Bax/Bcl-xL基因表达水平比值(P＜0.05)，与Imatinib联合后上调更显著(P＜0.01)。 结论：①Nef与Imatinib均能降低CML原代细胞PI3K/AKT通路上游bcr/abl mRNA表达水平;还可上调负调控基因PTEN mRNA与SHIP-2mRNA表达水平，但其对SHIP-1基因表达影响不明显。Bcr/abl与PTEN和SHIP-2基因表达水平呈直线负相关。②Nef与Imatinib对通路中PIK3CA mRNA和Akt mRNA表达影响不明显，对Akt总蛋白表达影响也不明显;但均能下调Akt磷酸化蛋白表达水平。两者联合时可降低此通路中mTOR mRNA表达水平。③Nef联合Imaitinib可降低通路下游Bcl-2家族成员Bcl-2 mRNA和Bcl-xL mRNA表达水平;同时两者均能上调家族中Bax mRNA表达水平;Nef可上调Bax/Bcl-2和Bax/Bcl-xL基因表达水平比值，与Imatinib联合后两比值上调更明显。