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目的： 创伤性脑损伤（traumatic brain injury, TBI）会引起组织丢失和严重的神经功能障碍，目前几乎没有有效的治疗方法。大脑由灰质和白质组成，而灰质主要由神经元的胞体、突触和星形胶质细胞构成，白质主要由神经纤维和外面包裹的少突胶质细胞形成的髓鞘构成。TBI不仅造成神经元和突触损害，还能引起轴突损伤和少突胶质细胞死亡。星形胶质细胞和小胶质细胞在TBI后发挥重要作用，但调节它们的分子机制目前仍不十分清楚。有研究报道，A1型星形胶质细胞是一种有害的星形胶质细胞表型，可以诱导神经元死亡和突触丢失，可以被小胶质细胞分泌的细胞因子激活。白质损伤的修复也受到小胶质细胞极化的影响。过氧化物酶体增殖物激活受体γ（ peroxisome proliferator-activated receptor gamma, PPARγ）是一种核内转录因子，可以调控小胶质细胞极化。维甲酸X受体（retinoid X receptor, RXR）是一种核内受体，可以和PPARγ组成异二聚体，调控靶基因功能。贝沙罗汀是一种高选择性的RXR激动剂，T0070907是一种选择性的PPARγ抑制剂，均可以通过血脑屏障。本研究通过建立小鼠TBI模型，给予贝沙罗汀并检测其对大脑皮层和海马所代表的灰质以及胼胝体、内囊和外囊代表的白质的保护作用，并探讨其对星形胶质细胞表型、小胶质细胞极化的影响，探究PPARγ参与的相关机制。 方法： 1、C57BL/6J小鼠72只随机分为四组：假手术组（n=18）、安慰剂组（n=18）、贝沙罗汀组（n=18）、贝沙罗汀+T0070907组（n=18）。采用控制性皮质损伤（controlled cortical impact, CCI）法建立小鼠TBI模型。CCI后每天腹腔注射贝沙罗汀或安慰剂、PPARγ的拮抗剂T0070907和5-溴脱氧尿嘧啶核苷（5-Bromo-2-deoxyUridine, BrdU）。神经损伤严重程度评分（neurological severity scores, NSS）和水迷宫实验验证贝沙罗汀对TBI后小鼠的感觉运动功能和学习记忆功能的影响。建模后14天免疫荧光检测神经元存活和突触密度，检测轴突再生、髓鞘完整性和少突胶质细胞前体细胞（oligodendrocyte precursor cell, OPC）的数量。Western blot检测突触前蛋白标记物synaptophysin和突触后蛋白标记物突触后致密蛋白95（postsynaptic density protein95, PSD-95）的表达，检测生长相关蛋白43（growth associated protein43, GAP43）和髓鞘碱性蛋白（myelin basic protein, MBP）的表达。 2、C57BL/6J小鼠180只随机分为四组：假手术组（n=41）、安慰剂组（n=49）、贝沙罗汀组（n=49）、贝沙罗汀+T0070907组（n=41）。采用CCI法建立小鼠TBI模型。CCI后每天腹腔注射贝沙罗汀或安慰剂或T0070907。免疫荧光检测A1型星形胶质细胞数量和cleaved caspase-3阳性细胞数，检测M1型小胶质细胞的数量和M2型小胶质细胞的数量以及脑源性神经营养因子（brain derived neurotrophic factor, BDNF）的表达。Western blot检测A1型星形胶质细胞标志物表达、凋亡相关蛋白的表达、小胶质细胞来源的肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α, TNF-α）、白介素-1α（interleukin-1α, IL-1α）、补体成分1q亚单位α链（ complement component1 q subcomponentαchain, C1qα）和BNDF的表达、M1型小胶质细胞标志物的表达和M2型小胶质细胞标志物的表达。实时荧光定量聚合酶链式反应（ quantitative real-time polymerase chain reaction, qPCR）检测小胶质细胞来源的TNF-α、IL-1α和C1qα的信使核糖核酸（messenger ribonucleic acid, mRNA）水平，检测M1型小胶质细胞和M2型小胶质细胞标志物的mRNA水平。Western blot检测RXRα和PPARγ的核转位，转录活性试验检测PPARγ依赖的转录，探讨贝沙罗汀影响小胶质细胞极化的作用机制。 3、C57BL/6J小鼠45只随机分为PBS组（n=9）、IgG组（n=9）、TNF-α中和抗体（anti-TNF-α）组（n=9）、IL-1α中和抗体（anti-IL-1α）组（n=9）和C1qα中和抗体（anti-C1qα）组（n=9）。采用CCI建立小鼠TBI模型，侧脑室注射TNF-α中和抗体、IL-1α中和抗体、C1qα中和抗体、PBS或IgG。免疫荧光检测A1型星形胶质细胞数量，Western blot检测A1型星形胶质细胞标志物的表达，探讨TNF-α、IL-1α和C1qα对A1型星形胶质细胞的影响。 4、C57BL/6J小鼠25只随机分为对照组（n=5）、TBI后第1天组（n=5）、TBI后第3天组（n=5）、TBI后第7天组（n=5）和TBI后第14天组（n=5），采用CCI建立小鼠TBI模型，Western blot检测RXRα和PPARγ分别在总蛋白、胞浆中和核中的表达。 结果： 1、与安慰剂组相比，贝沙罗汀组小鼠感觉运动功能和学习记忆功能明显改善。TBI后14天，贝沙罗汀促进神经元存活，增加突触密度，促进轴突再生，保存髓鞘完整性，促进OPC增殖。T0070907减轻了贝沙罗汀的这些作用。 2、与给予安慰剂相比，TBI后14天，贝沙罗汀组A1型星形胶质细胞数量明显减少，细胞凋亡明显减少，小胶质细胞来源的TNF-α、IL-1α和C1qα表达的表达明显降低，M1型小胶质细胞极化减少，M2型小胶质细胞极化增加。小胶质细胞来源的BDNF的表达增加。T0070907部分消除了贝沙罗汀的这些作用。与PBS对照组相比，TNF-α中和抗体组、IL-1α中和抗体组和C1qα中和抗体组的A1型星形胶质细胞数量明显减少。 3、TBI后RXRα和PPARγ在胞浆中的表达先降低后升高，在核内的表达先升高后降低。TBI后14天，与安慰剂组相比，贝沙罗汀组RXRα和PPARγ在胞浆中的表达明显降低，在核内的表达明显升高。T0070907没有影响贝沙罗汀对RXRα的作用，但消除了它对PPARγ的作用。TBI后PPARγ的转录活性明显增加。与安慰剂组相比，贝沙罗汀增加了PPARγ的转录活性，而T0070907减轻了贝沙罗汀的这种作用。 结论： 1、贝沙罗汀可以促进小鼠TBI后神经元存活，增加突触密度，促进轴突再生，保持髓鞘完整性，改善神经功能。 2、贝沙罗汀的神经保护作用可能与其减少A1型星形胶质细胞数量和促进小胶质细胞从M1型向M2型极化有关。 3、贝沙罗汀的作用可能部分通过促进PPARγ的核转位和其依赖的转录。