第一部分建立谷氨酸钠诱导的代谢综合征小鼠模型目的：乳鼠皮下注射MSG诱导MetS小鼠模型。方法：健康昆明小鼠(雌雄各半,10周龄),由华中科技大学同济医学院动物饲养中心提供。适应性饲养2周,至12周龄时,按照雄雌1：1比例进行配种。保持饲养间温度22±2℃,湿度55±5%及12h光照周期。出生后雄性乳鼠于出生后2-8天皮下注射MSG (3mg/g/d,生理盐水(Saline)溶解)或Saline。待乳鼠21日龄时断乳分笼,分成Saline组和MSG组,n=10。每周监测各组小鼠的体重及摄食量。饲养至18周龄时,记录小鼠体重、腰围、体长,取禁食血液分离血清,检测各组小鼠的血清血糖、甘油三脂、总胆固醇、胰岛素水平。后宰杀,分离相应组织器官,称重、记录,冻存备测。Western blot方法分析小鼠肌肉组织中AMP激活的蛋白激酶(AMPK)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)以及葡萄糖转运因子4(GLUT4)的蛋白表达水平。结果：(1)MSG小鼠出现了明显的肥胖。与对照组Saline小鼠比较,MSG小鼠表现出向心性肥胖体征,其体重(增加18%)、腰围(增加26%)、Lee指数(增加17%)以及脂肪含量(增加734%)均显著增加,差异均具有统计学意义(p<0.001)。(2)MSG小鼠空腹血糖水平升高。通过对MSG小鼠空腹血糖水平的检测,我们发现MSG小鼠血糖明显升高,与Saline小鼠血糖值比较,差异具有统计学意义(p<0.05)。(3)MSG小鼠出现了脂代谢紊乱。与Saline小鼠比较,MSG小鼠表现出较高的血清甘油三脂(TG)和总胆固醇(TC)水平(TG升高：52%,TC升高：49%)。(4)MSG小鼠出现了高胰岛素血症和胰岛素抵抗。MSG小鼠的血清胰岛素水平明显升高(p<0.001),计算的胰岛素抵抗指数表明,与对照组Saline小鼠比较,MSG小鼠已存在显著的胰岛素抵抗(p<0.001)。(5)Western blot检测发现MSG小鼠肌肉组织中的AMPK信号通路以及GLUT4蛋白表达发生了改变,表现为：AMPK、ACC的磷酸化蛋白水平下降,GLUT4的蛋白量下调。结论：乳鼠皮下注射MSG诱导MetS小鼠模型较好的模拟了人类MetS的病理生理特征。该模型的成模率接近100%,造模条件要求低,操作易掌握,且造模经济成本低,是一种较理想的MetS动物模型,可为抗代谢综合征药物的药效学研究提供理想平台。第二部分PMQ抗代谢综合征的药理作用研究目的：利用MSG小鼠模型评价PMQ是否具有改善代谢综合征的作用。方法：MSG小鼠和对照组Saline小鼠,于21天龄分笼,适应性喂养2周。第5周龄时,进行分组,每组动物数n=10：对照组Saline小鼠+溶剂组(Control);MSG小鼠+溶剂组(Vehicle); MSG小鼠+罗格列酮5mg/kg组(RSG 5); MSG小鼠+PMQ 5,10,20 mg/kg组(PMQ 5,PMQ 10,PMQ 20)。采用灌胃给药,每日1次。每周监测各组小鼠的体重及摄食量。18周龄时,记录各组小鼠体重、腰围、体长,取禁食血液分离血清,检测各组小鼠的血清血糖、甘油三脂、总胆固醇、胰岛素水平。后宰杀,分离相应组织器官,称重、记录,冻存备测。结果：PMQ各给药组的小鼠的体重、腰围、Lee指数以及脂肪含量与溶剂组比较,均出现不同程度的降低。其中,PMQ 20mg/kg剂量组可使MSG小鼠的体重降至溶剂组的75%,腰围降至溶剂组的89%,Lee指数降至溶剂组的92%,脂肪含量降至溶剂组的58%。差异均具有统计学意义(p<0.01)。结果表明,PMQ对于MSG小鼠具有显著的减肥作用。同时,PMQ可改善MSG小鼠的糖脂代谢紊乱。对于糖代谢,PMQ 5、PMQ 10、PMQ 20剂量组可剂量依耐性地降低MSG小鼠的血糖水平(分别降至溶剂组的69%、64%、55%)。对于脂质代谢,PMQ各剂量组同样能不同程度地降低MSG小鼠的血清甘油三酯及总胆固醇的水平。此外,PMQ还可以剂量依赖性地降低MSG小鼠的血清胰岛素水平(PMQ5:65%, PMQ 10:58%, PMQ 20:39% vs Vehicle组),并显著地改善MSG小鼠的胰岛素抵抗,差异均具有统计学意义。结论：五甲基槲皮素对于MSG小鼠可发挥较为全而的抗代谢综合征作用。包括,改善肥胖、糖脂代谢紊乱以及胰岛素抵抗。第三部分PMQ抗代谢综合征的作用机制研究目的：在整体和细胞水平初步探讨PMQ抗代谢综合征的作用机制。方法：C2C12肌原细胞生长至80%-90%满时,换入诱导分化液(含2%马血清的高糖DMEM培养基)代替完全培养基进行诱导分化,待C2C12肌原细胞分化成熟后,给予不同浓度PMQ(1,3,10μM)处理,作用24小时,MTT检测C2C12成肌细胞的活力,葡萄糖消耗量试验检测C2C12成肌细胞的糖摄取能力；RT-PCR检测C2C12成肌细胞脂肪酸氧化相关基因的mRNA表达；Western blot分别在整体和离体水平检测MSG小鼠肌肉组织及C2C12成肌细胞的AMPK信号通路及GLUT4的蛋白表达。结果：MTT实验结果表明,PMQ 1-10μM浓度处理24h对C2C12成肌细胞的活力无明显影响,表明,在此实验剂量范围内(1-10μM) PMQ对于C2C12成肌细胞无毒性作用。葡萄糖消耗量结果表明：PMQ可剂量依赖性的增加C2C12成肌细胞的葡萄糖消耗量。PMQ 1-10μM处理组可使C2C12成肌细胞的葡萄糖消耗量增加19%—65%。RT-PCR检测可知,PMQ可不同程度地增加C2C12成肌细胞的脂肪酸氧化相关基因mRNA表达。这些基因包括：过氧化物酶体增殖活化受体γ辅助活化因子1α(PGC-1α)、过氧化物酶体增殖活化受体α(PPARa)、中链酰基辅酶脱氢酶(MCAD)、酰基辅酶A氧化酶(ACO)、肉碱棕榈酰转移酶-1b(CPT-1b)。Western blot结果表明：PMQ可在整体(MSG小鼠肌肉)和细胞水平(C2C12成肌细胞)上剂量依赖性地增加AMPK和ACC的磷酸化蛋白水平,同时可上调GLUT4的蛋白表达量。时程依赖性实验结果表明,PMQ对于C2C12成肌细胞AMPK的激活作用至少能维持16h以上。结论：激活AMPK信号通路是PMQ发挥抗代谢综合征作用的重要机制。