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目的糖皮质激素(glucocorticoids, GCs)在临床上应用广泛,常用药物包括氢化可的松、泼尼松、甲基泼尼松龙等,其中可的松和泼尼松需要经GCs类药物活化关键酶-11β-羟基类固醇脱氢酶(11 beta hydroxysteroid dehydrogenase type 1,11β-HSD1)的催化还原为氢化可的松和泼尼松龙才能发挥治疗作用。上世纪七、八十年代进行的关于“伴有肝损伤的患者GCs的活化是否受影响”的相关研究结论不统一,观点存在争议。九十年代前后人们分离并纯化出来11β-HSD1基因与蛋白质,但没进行肝损伤时相关变化的研究。为了为伴有肝损伤的患者合理使用GCs提供更充分的依据,我们进行了不同程度急性肝损伤时大鼠肝脏11β-HSD1的基因表达、蛋白质表达量的变化及其与转氨酶的相关性研究。方法1.急性肝损伤模型的建立和验证36只雄性SD大鼠按体重分层随机分成A、B、C、D、E、F六组,每组6只,造模一周前各取空白血2mL,造模时A、B、C、D、E、F六组分别按大鼠重量1mL/kg腹腔注射体积百分比为0%、6.25%、12.5%、25.0%、50.0%、100.0%的CCl4/玉米油溶液,24h后取血2mL及肝组织。检测造模前后大鼠血清中肝功能生化指标ALT、AST、总胆红素和白蛋白的变化。用HE染色的方法检测大鼠肝组织的病理损伤程度。2.大鼠肝脏11β-HSD1的基因表达水平的测定利用RT-qPCR方法检测各样本11β-HSD1的基因表达水平。3.大鼠肝脏11β-HSD1表达位置及表达量的检测利用免疫组化方法对各样本的11β-HSD1表达位置和表达量进行半定量检测,利用Western-blot方法定量检测各样本的11β-HSD1蛋白质表达水平。4.数据分析利用SPSS17.0对造模前后的大鼠体重、ALT、AST和白蛋白进行成对t检验,α=0.05；对造模后组间的肝脏重量、ALT、AST、白蛋白、11β-HSD1基因表达量和蛋白质表达量进行单因素方差分析,a=0.05；对11β-HSD1基因表达量、蛋白质表达量与造模后的血清ALT、AST、白蛋白之间进行相关和回归分析。结果1.急性肝损伤的模型建造成功。造模前、后各组ALT、AST、白蛋白改变明显(p=0.003,p=0.000,p=0.000),造模后各组间大鼠的ALT和AST的改变程度组间存在差异(p=0.000,p=0.000),组间白蛋白改变差异较小(p=0.075)。大鼠肝组织切片显示中央静脉周围细胞受损,随CCl4剂量增大细胞溶解的区域和面积增多；2. 11β-HSD1基因表达量组间无明显差异(p=0.705),与ALT、AST具有相关性(r=-0.36,p=0.021. r=-0.324, p=0.035),与白蛋白不具有相关性(p=0.998)；3.免疫组化中半定量计算11β-HSD1蛋白质表达量,组间变化有区别(p=0.013)。随着CCl4剂量的增加,中央静脉周围开始部分细胞凋亡,继而片状肝细胞凋亡,最后大片坏死,而开始11β-HSD1表达增多,达到最大值后开始降低。Western blot检测11β-HSD1蛋白质表达水平时发现组间有明显的差异(p=0.000),蛋白质表达水平与ALT、AST不具有相关性(p=0.07和p=0.07),随ALT、AST的升高,11β-HSD1蛋白质表达水平呈先升高后降低的趋势；11β-HSD1蛋白质表达水平与白蛋白无相关性(p=0.334)；4. 11β-HSD1基因表达水平与蛋白质表达水平具有中等的负相关性(r=-0.328,单侧p=0.033)结论1.肝损伤对大鼠肝脏11β-HSD1基因表达有影响,随着肝损伤程度的加重,大鼠肝脏11β-HSD1基因表达呈下降趋势,并且与ALT、AST具有相关性,当ALT达到111.0 IU/L或AST达到97.5 IU/L时,11β-HSD1基因表达量降低至起始的一半；2.肝损伤对大鼠肝脏11β-HSD1蛋白质表达有影响,随着肝损伤程度的加重,11β-HSD1蛋白质表达量随ALT、AST的增高呈先升多后降低的规律,当ALT=102.9 IU/L或AST=92.1 IU/L时,11β-HSD1蛋白质表达量最高；3.肝损伤时,11β-HSD1蛋白质表达位置有变化,随着肝损伤程度的增加,表达位置逐渐远离中央静脉；4.肝损伤时,11β-HSD1基因表达水平与蛋白质表达水平呈负相关性；