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在用对峙培养法进行荔枝霜疫霉拮抗菌的筛选中,发现得自鼎湖山自然保护区的白地霉菌(Geotrichum candidum)菌株SC0581具有较强的拮抗活性。为了寻找抑菌活性成分,对这株菌的菌丝体的次生代谢产物进行了研究。
将该菌株菌丝体进行固体发酵培养,对其发酵培养物用95%乙醇提取,乙醇提取物依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取分部。对分部提取物进行抗菌活性测定,对有拮抗荔枝霜疫霉的氯仿萃取部分、乙酸乙酯萃取部分和正丁醇萃取部分进行分离纯化。运用硅胶柱层析、反相柱层析和Sephadex LH-20凝胶柱层析、HPLC分别进行分离,共得到了8个化合物(1-8)。应用现代光谱技术(UV、ESI-MS、HRTOFMS、1D NMR、2D NMR)鉴定了这8个化合物的结构。其中化合物1为一新的环肽类化合物,结构为环(苯丙氨酸-氮甲基酪胺酸)[cyclo(phenylalanyl-N--methyl-tyrosyl)];其它化合物分别为尿嘧啶(uracil,2)、胸腺嘧啶(thymine,3)、焦儿茶酸(pyrocatechuic acid,4)、3,5-二羟基苯甲酸(3,5-dihydroxy benzoic acid,5)、4-羟基苯甲酸(p-hydroxybenzoic acid,6)、7,8-dimethylalloxazine(7)和亮氨酸(leucine,8)。8个化合物均为首次从白地霉中得到。
采用管碟法试验化合物的抗荔枝霜疫霉活性,结果显示,化合物1有较强的抗真菌活性。进一步用Alarma blue法测定化合物1的抗荔枝霜疫霉活性,结果显示其抑菌中浓度IC50为174.6μg·ml-1,活性略强于阳性对照酮康唑。其余化合物对荔枝霜疫霉无明显抑制活性。
采用咸水虾(Artemia salina)致死试验检测化合物的毒性,结果显示,化合物1表现出很微弱的毒性,其半数致死浓度LD50为625.9μg·ml-1。