腺苷工艺优化及放大初步研究

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本论文对枯草芽孢杆菌生产腺苷进行培养基优化以及放大的初步研究。首先通过摇瓶实验单因素分析发现在培养基中添加蛋白胨、丝氨酸、苏氨酸、葡萄糖酸钙、柠檬酸钠、H<,2>O<,2>,均能够提高腺苷的积累。在此基础上对所选取的优化因子进行二水平因子设计,确定各种影响因子的最佳浓度。通过响应面设计及其二次回归模型求极值,得到当蛋白胨0.2g/L、丝氨酸80mg/L、苏氨酸20mg/L、葡萄糖酸钙5g/L、柠檬酸钠、H<,2>O<,2>30mg/L时,预测腺苷产量可达到10.80g/L。在此条件下验证实验,腺苷产量可达到10.67g/L,较优化前的7.21g/L,提高了48%。在腺苷发酵放大的初步研究中首先对补料以及溶氧的控制进行了讨论。实验表明,连续补料流加蔗糖,并在发酵前期控制低溶氧对于腺苷发酵有利。接着在实验中发现采取流加黄嘌呤可提高菌株稳定性,腺苷产量达到6.25g/L。同时对添加柠檬酸钠在罐上进行放大研究,发现添加0.2g/L的柠檬酸钠,产苷达到6.86g/L,较对照提高9.58%,并且腺苷对葡萄糖得率可提高19%。
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