鲍遗传多样性与种质资源鉴定的研究

来源 :辽宁师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lioutao2009
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利用RAPD技术对皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai Ino)、杂色鲍(Haliotis diversicolar Reeve)及日本黑鲍(Haliotis discus discus hannai Ino)进行了遗传多样性和遗传差异分析,并检测到种群的一些特异性遗传标记.在鲍DNA提取中,尝试先将材料用75%乙醇固定,然后再提取DNA,对其检测并应用于RAPD分析.结果表明,用乙醇固定材料提取DNA是一种切实可行的方法.通过对鲍基因组DNA RAPD-PCR反应条件的摸索比较,确定了鲍DNA的RAPD-PCR反应体系,反应总体积为25μl,模板DNA40ng,dNTP各200μmol,primer(随机引物)40ng,Taq聚合酶2u,Mg<2+>2mmol,预变性94℃5min,共进行40个循环,包括变性94℃1min,退火37℃1min,延伸72℃1min,最后再延伸10min.扩增产物用EB染色,用1.3%琼脂糖凝胶电泳分离.对皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai Ino)、杂色鲍(Haliotis diversicolar Reeve)和日本黑鲍(Haliotis discus discus hannai Ino)三个种群进行了RAPD检测,共检测到213个位点,在群体之间和个体之间都存在差异.利用PopGen32软件计算各群体的多态性比例、群体遗传杂和度和群体间的遗传距离,多态比例分别为46.35%、49.30%和52.11%,三个群体的平均杂合度为0.1557、0.1683和0.1860.依遗传距离用UPGMA方法建立了三个群体的系统关系图,结果表明皱纹盘鲍和日本黑鲍有很近的遗传关系,二者与杂色鲍都相距较远.对大连、青岛的两个杂交鲍群体和两个自然种群进行了分析比较,共检测到173个位点.在自然种群和杂交群体之间及两个杂交群体之间都存在差异,利用PopGen32软件计算了各个群体的多态位点比例、平均遗传杂合度、Shannon多态性指数和群体间的遗传距离.结果表明,杂交群体的遗传多样性高于自然群体,从遗传多样性角度揭示了鲍杂种优势的存在.两个杂交群体的遗遗传结构比较相似.不同的种群各有一些不同的特异性扩增片段,可作为种群的特异性遗传标记.
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