目的以山西连翘药材为研究对象,并与陕西、河北、河南等产地连翘比较,从遗传信息、活性成分和生物效应等方面进行道地性研究。首先,运用RAPD-PCR技术进行遗传多样性的研究分析并构建DNA指纹图谱；其次,采用GC、HPLC法进行不同产地连翘挥发油、木脂素、苯乙醇苷、黄酮类等成分的含量比较研究；建立连翘药材中多种微量元素的含量测定方法,进行不同产地连翘中微量元素的含量分析；再次,比较不同产地连翘挥发油和水煎液的体外抗菌、抗甲型流感病毒(H1N1)活性。最后,综合运用DNA、GG、HPLC技术及一测多评法,建立山西连翘药材的品质评价体系。方法1.从连翘新鲜果实中提取DNA,采用RAPD-PCR技术,从45条RAPD随机引物中筛选出多态性好的引物,用于不同产地连翘的DNA指纹图谱构建,所得数据用NTSYS-pc2.1软件计算材料间的遗传相似系数,应用UPGMA法进行聚类分析；2.采用水蒸气蒸馏法提取连翘药材的挥发油,应用气相色谱法分析检测比较主要成分(α-蒎烯、莰烯、p-蒎烯、月桂烯、对伞花烃、柠檬烯、α-松油醇)的含量；采用回流提取法提取连翘药材的化学成分,应用高效液相色谱法分析检测比较连翘药材主要成分(松脂醇-β-D-葡萄糖苷、连翘酯苷A、连翘酯苷B、芦丁、连翘苷、连翘酯素)的含量。3.采用火焰原子吸收光谱法,浓HNO3-HClO4 (4:1)为消解剂,进行不同产地连翘微量元素K、Mg、Ca、Na、Mn、Fe、Cu、Zn的含量测定。4.采用K-B纸片扩散法,以抑菌圈直径为评价指标,研究不同产地连翘挥发油及水煎液的体外抗菌(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎双球菌、枯草杆菌、白色念珠菌)的活性；采用药物对MDCK细胞毒性和抗甲型流感病毒活性实验,以SI为评价指标,研究不同产地连翘药材的体外抗甲型流感病毒(H1N1)的活性；5.采用气相色谱法,以柠檬烯为内参物,建立其它待评价成分(α-蒎烯、莰烯、β-蒎烯、月桂烯、α-松油醇)的相对校正因子,用于比较一测多评法计算值与外标法实测值的差异,以相对误差验证一测多评法用于不同产地连翘挥发油中6种成分含量测定的可靠性；采用液相色谱法,以连翘苷为内参物,建立其它待评价成分(松脂醇-β-D-葡萄糖苷、连翘酯苷A、连翘酯苷B、芦丁、连翘酯素)的相对校正因子,用于比较一测多评法计算值与外标法实测值的差异,以相对误差验证一测多评法用于6种成分含量测定的可靠性。结果1.连翘药材遗传信息研究共筛选出11条多态性好的引物,PCR扩增共获得80条谱带,平均每个引物扩增出7.27条谱带,多态性谱带67条(比率为83.8%),可作为连翘药材资源研究的一种有效分子标记；聚类分析结果显示,从遗传相似系数0.672处划分,14批连翘药材可分成两大类：山西独聚一类,河北、河南、陕西聚为另一类。2.采用GC法测定不同产地连翘挥发油中主要成分的含量存在明显差异,山西连翘挥发油主成分含量整体上高于河南、河北、陕西产地；采用HPLC法测定不同产地连翘主要成分的含量也存在一定差异,山西产地连翘药材主要成分(松脂醇-β-D-葡萄糖苷、连翘酯苷B、连翘酯苷A、连翘苷、连翘酯素)含量整体高于河南、河北、陕西。3.采用AAS法测定连翘各微量元素,该方法准确度与重复性良好,不同产地连翘药材各微量元素存在差异。4.不同产地连翘挥发油及水煎液对5种供试菌均有不同程度的抑制和灭活作用,山西连翘挥发油及水煎液体外抗菌活性整体上优于河南、河北、陕西；不同产地连翘药材对甲型流感病毒均有不同程度的抑制作用,山西连翘药材的效果整体高于河南、河北、陕西。5.采用GC法,一测多评法用于连翘挥发油中主要成分的结果显示,建立的相对校正因子重复性良好,一测多评法计算值与外标法实测值相对误差<5%,2种计算结果没有显著性差异；采用HPLC法,一测多评法用于连翘主要成分的测定结果显示,建立的相对校正因子重复性良好,一测多评法计算值与外标法实测值相对误差<5%,2种计算结果没有显著性差异。结论实验研究表明山西连翘药材“道地性”体现在DNA遗传信息、活性成分及抗菌、抗病毒药效作用等方面；建立的一测多评法同步测定连翘多指标成分,方法简便、快速、灵敏及可重复性的特点,可用于其质量评价。研究结果为山西连翘药材的道地性、品质评价体系提供理论依据,为连翘药理评价和临床合理用药提供参考,也为山西道地连翘药材野生抚育和规范化种植提供科学依据。