为了探讨紧密连接蛋白claudin-6在不同肿瘤细胞株及人乳腺癌组织中的表达及意义,应用RT-PCR法和免疫组织化学染色S-P法检测该基因在多种肿瘤细胞株和人乳腺癌组织中claudin-6的表达,分析claudin-6与乳腺癌生物学行为的关系;同时构建claudin-6真核表达载体pcDNA3.1(+)/claudin-6,为claudin-6对乳腺癌细胞表型改变的研究奠定了实验基础。结果显示:1. RT-PCR结果显示,claudin-6在乳腺上皮细胞株HBL-100和卵巢癌细胞株CocⅠ中有表达,在其余被检细胞株中均无表达。提示,不同肿瘤细胞中claudin-6差异表达可能与claudin-6的细胞特异性有关。2.免疫组化结果表明,乳腺癌组织中claudin-6表达明显低于对照组,P<0.05。Claudin-6低表达与乳腺癌病理分级及淋巴结转移有关,P<0.05。提示,claudin-6可能在乳腺癌的发生发展和转移中起负性调控作用,并可作为判断乳腺癌转移和预后的参考指标。3. Claudin-6真核表达载体构建:获得了人claudin-6基因的全长cDNA片段,构建了claudin-6原核表达载体和真核表达载体。实验中发现,中国人claudin-6基因的461位点碱基为A,而GeneBank中西班牙人claudin-6基因的461位点碱基为G,说明claudin-6基因461位点可能存在多态性。上述结果表明,claudin-6在不同肿瘤中的差异表达与该基因组织特异性有关;claudin-6在乳腺癌中的表达下调,或许通过破坏紧密连接的完整性,为乳腺癌细胞侵袭、转移创造了条件。Claudin-6真核表达载体的构建为进一步研究claudin-6基因对乳腺癌细胞侵袭和转移表型的影响提供了理论和实验基础。