基于电子鼻/电子舌的展青霉素产生菌株识别方法研究

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扩展青霉等青霉引起的展青霉素污染的问题是制约我国浓缩苹果汁和苹果产业发展的重要因素。造成苹果汁质量问题的同时又对消费者的健康构成威胁。因此,针对展青霉素污染及其产毒菌的及时、有效检测突显得尤为重要。根据该领域相关文献的报道,目前可以污染苹果等果品及其产品,并代谢产生毒素的微生物主要是霉菌属的青霉和曲霉菌,其中以扩展青霉的报道最多。如果可以对产毒菌快速实时有效的检测和识别并控制,则有利于将展青霉素污染带来的损失尽可能降低。本文先以3株霉菌、3株酵母、7株细菌组成的模式菌群为对象,研究了基于电子鼻和电子舌响应信号对不同属间微生物的准确区分,从而建立霉菌的识别方法。在此基础上进一步建立基于电子鼻和电子舌的展青霉素产生菌的识别方法。最后研究了电子鼻/电子舌对不同产毒能力扩展青霉的判别能力。得到如下研究结论:(1)电子鼻结合PCA方法可以准确识别霉菌样品。LDA分析,酵母样品与其他样品差异明显,被明显区分开。霉菌和部分细菌样品判别错误,无法区分。单独选择霉菌和细菌样品做进一步模式判别,霉菌样品被准确识别。电子舌检测的优化条件为搅拌转速2 rps最佳。基于电子舌数据的聚类分析表明,霉菌样品可以被正确分类,酵母和部分细菌无法区分。PCA和DFA,可判别不同属微生物的培养液,霉菌样品也被正确判别。Fisher判别分析法,建立的分类模型判别率85.7%,模型对验证样本的分类正确率96.9%。电子鼻传感器W5S、W3C、W1S、W3S,电子舌传感器ZZ、BB、CA、JB在区分不同属间微生物样品的判别中具有重要贡献。(2)电子鼻检测:PCA能很好的区分青霉和曲霉样品,也能对展青霉素产生菌和扩展青霉菌株有效识别。LDA在青霉和曲霉样品区分时,有一株曲霉和青霉样品部分重叠发生误判;对产毒菌的区分,扩展青霉5#菌与其他青霉(展青霉2#、灰黄青霉3#)挥发性成分相似。扩展青霉6#与其他青霉菌和曲霉菌完全区分开;其余产毒菌相聚较近,集中分布。电子舌检测:PCA和DFA对不同类型霉菌的培养液进行定性判别和区分,结果表明,PCA和DFA能实现对青霉和曲霉菌48 h培养液的属间区分,但不能实现种间的区分;DFA分析的结果优于PCA分析,两者均可以将扩展青霉等产毒菌同其他样品区分开,表明电子舌和电子鼻一样,也可以对展青霉素产生菌进行识别。(3)利用电子鼻和电子舌检测扩展青霉不同产毒培养时间段的液体培养物,并判定不同扩展青霉样品的产毒能力。结果表明不同产毒能力的扩展青霉在产毒培养的第4 d,电子鼻和电子舌传感器响应与产毒特性有良好的对应关系,从而对扩展青霉的产毒能力进行判定。初步得出第4 d为识别扩展青霉产毒的最适时间点。
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