目的:探究氟喹诺酮类抗菌药对大鼠胆汁酸代谢谱的影响,并比较不同氟喹诺酮药物(环丙沙星和莫西沙星)对胆汁酸谱的作用,最终为不同氟喹诺酮药物的合理选择使用提供理论依据。方法:(1)建立高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)法同时测定大鼠血清和肠道内容物中15种胆汁酸组分的浓度。选用Xterra RP18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈和10 mmoL·L1的醋酸铵水溶液,梯度洗脱,流速为1 mL·min-1,采用电喷雾离子源-三重四极杆质谱仪于负离子模式下进行多反应监测。采用活性炭吸附的方法制备空白基质,血清样本采用乙腈沉淀蛋白并浓缩后进样分析,肠道内容物匀浆样本加入氨水除去杂质并浓缩后进样分析。15种胆汁酸分别为:胆酸,鹅去氧胆酸,熊去氧胆酸,去氧胆酸,石胆酸,牛磺胆酸,牛磺鹅去氧胆酸,牛磺熊去氧胆酸,牛磺去氧胆酸,牛磺石胆酸,甘氨胆酸,甘氨鹅去氧胆酸,甘氨熊去氧胆酸,甘氨去氧胆酸,甘氨石胆酸。(2)雄性Wistar大鼠随机分成三组,一组为对照组仅给予溶媒液,另两组给予100 mg·kg-1·day-1的环丙沙星以及40 mg·kg-1·day-1莫西沙星灌胃7天后,颈动脉取血用于测定血清中的15种胆汁酸浓度,并收集大肠中的内容物用于肠道胆汁酸成分的分析,运用Illumina高通量测序技术分析肠道内容物中肠道菌群的组成。结果:本课题建立的HPLC-MS/MS方法灵敏度高、专属性好,能够用于大鼠血清以及肠道内容物中15种胆汁酸组分的检测。各胆汁酸组分在定量范围内线性关系良好,空白基质中的内源性杂质对胆汁酸组分以及内标的检测没有干扰。日内和日间精密度结果均<15%,血清与肠道内容物匀浆低、中、高浓度提取回收率分别在69.93%～88.83%和83.16%～109.30%之间,血清和肠道内容物匀浆中胆汁酸的基质效应分别在85.41%～113.57%和94.64%～112.86%范围内,所有胆汁酸组分在反复冻融,室温放置24h,-80℃冷冻3个月以及4℃进样器放置72h后稳定性均良好。环丙沙星和莫西沙星对血清胆汁酸谱的影响:与对照组大鼠相比,环丙沙星和莫西沙星给药组大鼠的血清总胆汁酸浓度分别降低了大约85%和60%。环丙沙星给药组大鼠血清中牛磺酸结合型初级胆汁酸显著增加,而莫西沙星对血清中牛磺酸结合型胆汁酸无明显影响,次级胆汁酸在环丙沙星给药后显著降低。此外,环丙沙星给药还显著降低正常大鼠循环胆汁酸池的疏水指数,而莫西沙星组则无明显变化。环丙沙星和莫西沙星对大肠内胆汁酸组成的影响:环丙沙星和莫西沙星给药后大鼠肠道内胆汁酸的总浓度增加,环丙沙星显著增加肠道内牛磺酸结合型初级胆汁酸,降低次级胆汁酸,而莫西沙星对牛磺酸结合型胆汁酸和次级胆汁酸的影响不明显。环丙沙星给药后,大鼠肠道中牛磺胆酸与去氧胆酸的比值以及牛磺鹅去氧胆酸与石胆酸的比值均显著增加,而莫西沙星给药组则没有明显的变化趋势。环丙沙星和莫西沙星对肠道微生物的影响:环丙沙星显著增加了两种硬壁菌门(Firmicutes)水平[乳杆菌属(Lactobacillus)(200%↑),毛螺菌科相关属(Lachnoclostridium)(1200%↑)],而莫西沙星则抑制了(54%↓)和(50%↓)。其他 Firmicutes几乎均被环丙沙星和莫西沙星抑制。我们检测到的所有拟杆菌门(Bacteroidetes)均被环丙沙星所抑制,而莫西沙星对Bacteroidetes的作用弱于环丙沙星。环丙沙星给药后肠道Firmicutes与BacteBacteroidetes的比值显著增加。结论:本研究以环丙沙星和莫西沙星为代表,探索氟喹诺酮药物对胆汁酸代谢谱以及肠道微生物群的影响,并比较两者的区别。结果发现,环丙沙星给药显著降低胆汁酸池的疏水指数并抑制肠道次级胆汁酸的生成,此外,环丙沙星还改变肠道微生物组成,肠道Firmicutes与Bacteroidetes的比值显著增加。我们的研究进一步阐明了氟喹诺酮药物对胆汁酸代谢谱的影响,研究结果能够为临床上对感染患者使用氟喹诺酮类抗菌药时选择合适药物提供理论依据。