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[目的]： 根据RNAi原理，构建针对survivin基因内含子序列和外显子序列的重组干扰质粒，转染HeLa细胞，在mRNA水平和蛋白质水平检测两类质粒对survivin的抑制效果，并了解其对细胞凋亡的影响。探索RNAi与mRNA前体、成熟mRNA之间的关系以及RNA干扰对转录过程的影响机制。 [方法]： 遵循RNA干扰设计的原则，设计并构建针对内含子4个靶点的pGP/U6/GFP/neo-survivin shRNA重组干扰质粒，并设置一个无关序列组即阴性对照组，2个针对survivin基因外显子序列的重组干扰质粒，通过脂质体转染法将重组干扰质粒瞬转至HeLa细胞。运用实时荧光定量PCR相对定量检测survivinmRNA的表达水平，筛选出抑制效果较好的质粒，用Western Blot检测Survivin蛋白表达水平。并且通过AnnexinⅤ-FITC和PI双染色法、Hoechst33258染色了解RNAi对HeLa细胞凋亡的影响。 [结果]： 成功构建了针对survivin内含子和外显子序列的重组干扰质粒pGP/U6/GFP/neo-survivin shRNA。转染HeLa细胞后，与阴性对照组和空白组比较，实验组的survivin mRNA均被有效抑制，均具有统计学意义(P＜0.05)，其中转染pGP/U6/GFP/neo-survivin-shRNA-4重组质粒组的干扰效果更好。并且Survivin蛋白也随之减少。荧光显微镜观察HeLa细胞的凋亡，实验组明显多于阴性对照组和空白组。流式细胞术测得HeLa细胞的凋亡率，实验组与空白组相比有统计学意义（P＜0.01）。 [结论]： 针对survivin内含子和外显子序列的重组干扰质粒均可以使HeLa细胞中的survivin mRNA和蛋白水平明显下降，实验组细胞凋亡明显。说明RNAi对成熟或未成熟mRNA均具有干扰作用，都能影响细胞的细胞凋亡，并且针对survivin基因内含子的干扰重组质粒可能干扰效果更好。