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目的:探究在胃癌细胞株SGC7901中上调Tspan9后,细胞自噬水平变化以及对5-Fu敏感性的影响。方法:选择人胃腺癌细胞株SGC7901作为研究细胞,提取空白质粒和Tspan9过表达载体。Tspan9过表达载体、空白质粒转染SGC7901细胞分别得到SGC7901/C、SGC7901/Tspan9细胞株,未作任何处理细胞命名为SGC7901/N。设置空白组(SGC7901/N)、阴性对照组(SGC7901/C)、实验组(SGC7901/Tspan9)。上述细胞转染48小时后,用RT-PCR及Western-blot检测其转染效率。通过CCK-8方法检测5-Fu作用下SGC7901/N、SGC7901/C、SGC7901/Tspan9细胞株的增殖能力,检测三组细胞株对5-Fu敏感性差异。通过RT-PCR、Western blot分析Tspan9的过表达对自噬标记物LC3、Beclin-1、P62及凋亡标记物Bcl-2、Bax表达的影响,从而阐明上调Tspan9对胃癌SGC7901细胞自噬水平的影响。比较在SGC7901/Tspan9细胞株中添加自噬抑制剂巴弗洛霉素A1,检测细胞中自噬及凋亡相关标记物的表达。通过CCK-8法检测抑制自噬后对细胞增殖活性的影响,进一步阐明细胞自噬水平的改变对5-Fu敏感性的影响。结果:与胃腺癌SGC7901细胞及转染空白质粒的SGC7901/C细胞相比,转染Tspan9过表达载体的SGC7901/Tspan9细胞中的Tspan9表达水平显著提高。用CCK-8法测定了不同浓度的5-Fu对胃癌SGC7901细胞增殖影响,结果表明5-Fu对胃癌SGC7901细胞有增殖抑制作用,上调胃癌SGC7901细胞中Tspan9的水平可以减弱5-Fu对其增殖抑制的作用。因此,上调Tspan9有助于胃癌SGC7901细胞的增殖,降低胃癌SGC7901细胞对5-Fu的敏感性。Western-blot结果提示在5-Fu作用下,胃癌SGC7901细胞中自噬被激活,上调Tspan9可诱导胃癌SGC7901细胞自噬增强。Western-blot结果显示应用自噬抑制剂后,细胞自噬水平降低且凋亡水平增高,CCK-8方法检测应用自噬抑制剂后,细胞活力明显降低,表明抑制自噬可以增加SGC7901细胞对5-Fu的敏感性。这表明Tspan9可以通过影响细胞自噬水平来降低胃癌SGC7901细胞对5-Fu的敏感性。结论:本研究结果表明Tspan9过表达可以诱导胃腺癌SGC7901细胞自噬水平增强,且这种自噬对细胞是保护性的,能够提高细胞增殖能力,抑制胃癌SGC7901细胞对5-Fu的敏感性。抑制细胞自噬可以促进细胞凋亡,增强胃癌SGC7901细胞对5-Fu的敏感性。