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研究目的: 运动可导致骨骼肌细胞氧化应激程度提高，尤其是其线粒体的自由基产生会大大增加。虽然已经知道Nrf2是抗氧化应激的一个信号通路，而且已有研究表明线粒体ROS产生能够激活Nrf2系统，但是在具体的运动过程中产生的氧化应激与Nrf2信号通路是怎样的关系尚不是很明确，需要进一步探讨。本研究主要是利用培养的C2C12作为细胞模型，以电刺激引起其收缩，模拟运动对C2C12细胞肌管自由基及Nrf2信号通路的影响。 研究方法: 以小鼠骨骼肌肌母细胞(C2C12)为研究对象，分化6天后进行电刺激，分为空白对照组和电刺激组。测定不同刺激时间C2C12肌管内活性氧ROS，GPx，HO-1蛋白的表达及Nrf2核蛋白含量的变化。 空白对照组:正常培养细胞，95％融合时，加入分化培养基，分化6天后，与其他各干预组同时收样。 电刺激组:正常培养细胞，95％融合时，加入分化培养基，分化6天后，进行电刺激，刺激时间为30、45、60、75、90、120和150min。 研究结果: (1)电刺激分化六天的C2C12细胞，肌管内ROS生成的量除刺激30min和150min组外，其余各刺激时间组都明显增加(P＜0.05)，该量随刺激时间的变化呈双峰曲线，在刺激60(P＜0.01)和120min(P＜0.01)时分别出现峰值。 (2)随电刺激时间的延长，C2C12肌管中谷胱甘肽过氧化物酶活性逐渐升高，在75min时到达一个高峰(P＜0.01)，随后90和120min时略有下降，但在150min时又升高，且明显高于75min(P＜0.05)时。 (3)随电刺激时间变化，C2C12肌管HO-1蛋白含量表达逐渐升高，在75min时到达一个高峰(P＜0.01)，随后90和120min时略有下降，150min时明显低于75min(P＜0.05)时。 (4)随电刺激时间的延长，C2C12肌管Nrf2核蛋白表达会逐渐增加，在75min时达到一个峰值(P＜0.01)，随后在90和120min时略有下降，150min时又达到一个高峰，且明显高于75min(P＜0.05)时。 结论: (1)在45V，20ms，5Hz的强度下，电刺激C2C12肌管会使的细胞内ROS生成量短时间内成增加趋势，随刺激时间延长，生成的ROS量呈双峰变化趋势，峰值分别出现在刺激60和120min时，说明电刺激使肌管发生了氧化应激。 (2)不同电刺激时间下，C2C12肌管Nrf2核蛋白含量在刺激60min时开始有显著性升高，GPx、HO-1活性在75min时有极显著性升高，结合ROS产生量随电刺激时间的变化规律，我们发现ROS只有达到一定量才能激活Nrf2信号系统，同时启动相关基因，使GPx、HO-1发挥抗氧化作用，而且随着刺激时间的增加，到150min时，HO-1活性所下降，GPx则继续保持着其较高的抗氧化能力。