YW243条锈病抗性基因定位及分子标记研究

来源 :西北农林科技大学 西北农林科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:action005
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小麦条锈病是危害中国小麦生产的主要病害之一,对小麦条锈病的遗传研究是小麦遗传育种和植物病理研究的重要课题.近年来由于植物细胞遗传学和分子遗传学的飞速发展,也使对于小麦条锈病遗传研究由以孟德尔遗传研究为主的宏观研究转到以染色体定位或分子标记为基础的微观研究,特别是分子标记的发展使得对小麦条锈病研究提高到了分子水平,甚至为小麦抗病基因克隆和抗病机制的研究提供了可能.条中31号小种是近年来危害小麦生产的主要生理小种之一,YW243具有对条中31号生理小种免疫近免疫的抗性基因,对其进行分子水平上的抗性研究,不但有利于提高中国小麦条锈菌的研究水平,而且对开发利用YW243的抗锈基因和提高抗锈育种有重要的指导意义.该试验采用分子标记:SSR、AFLP、RGAP等方法,结合经典遗传分析法,对组合中国春/YW243、YW243/明贤169的亲本、F<,1>、F<,2>通过抗性鉴定和统计分析,明确其抗条锈基因的遗传特点,寻找抗条中31号小种的分子标记,并对其进行定位.结果表明,YW243对条中31号小种的抗性是由一对显性基因控制,用264对SSR随机引物,900对AFLP随机引物,28对RGAP随机引物进行筛选,其中抗病池和感病池各由F2代7个抗感单株的DNA等量混合组成,在264对SSR随机引物中有4对引物Xgwm191、Xgwm3882、Xgwm501、Xgwm374在抗病亲本和抗病池、感病亲本及感病池之间扩增出差异性谱带,对4对引物进行连锁检验,引物xgwm388和xgwm501与抗性基因相连锁,并将抗性基因定位在2BL上.由于Yr5也位于2BL上,为了验证Yr5不同于该抗性基因,选择与Yr5完全连锁的SCAR标记SC-1320检测YW243,结果未扩增出任何片断,说明YW243中不含有Yr5;从系谱分析,Yr5来自斯卑尔脱小麦,YW243没有Yr5的血缘;从抗谱分析,Yr5对条中32号小种表现免疫或近免疫,在该试验中,对条中32号的反应型为"3"级.所以,YW243中抗条中31号小种的基因不是Yr5基因.该抗性基因可能是Yr5的复等位基因,或是一个新的抗性基因或是多基因聚合体.用引物Xgwm501对F<,2>代群体135个单株进行扩增和聚丙烯酰胺凝胶电泳,结果在100个抗病单株中,扩增出31个A型带,62个H型带,7个B型带;在35个感病单株中,扩增出2个A型带,12个H型带,21个B型带;用引物Xgwm388对F<,2>代群体79个单株进行扩增和聚丙烯酰胺凝胶电泳,结果在61个抗病单株中,扩增出13个A型带,35个H型带,13个B型带;在17个感病单株中,扩增出1个A型带,10个H型带,6个B型带;采用软件MapemakerEX3.0计算出该标记与抗性基因之间的遗传距离分别为23.5cM、27.9cM,LOD(似然比)18.6.
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