背景:类风湿性关节炎是一种原因未明的慢性炎症性疾病,临床表现主要是关节受累的体征和症状,且不可逆转,给患者身心健康造成严重影响。治疗药物首选甲氨蝶呤,但包括其在内的治疗药物都有很大的副作用,如胃肠损伤、肝肾损伤等。近年来,中医药在治疗疑难杂症方面有着得天独厚的优势,疗效好,且不良反应少,尤其对于类风湿性关节炎等免疫系统的疾病更是疗效俱佳。本课题旨在明晰改良桂枝芍药知母汤治疗类风湿性关节炎的疗效,阐明其作用机制,为今后的临床使用提供夯实的理论依据。方法:1.药效学研究:60只180～220g SD大鼠,随机分为6组,即空白组、模型组、阳性药物组、改良桂枝芍药知母汤低、中、高剂量组,每组10只。参照Freund的动物建模方法建立类风湿性关节炎大鼠模型。造模后空白组和模型组大鼠给予等量治疗剂量的生理盐水,阳性药组给予甲氨蝶呤,剂量为1mg/kg,改良桂枝芍药知母汤组分别给予10g/kg、20g/kg、40g/kg的治疗药物,每日灌胃给药一次,共3周。造模后每周测量一次各组大鼠关节肿胀情况,计算各组大鼠关节肿胀增加百分比,最后收集大鼠血清和踝关节,血清则用酶联免疫法来检测RF,TNF-α,IL-1β,IL-6和IL-10的水平。2.药效成分及作用机制预测:使用超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱法鉴定改良桂枝芍药知母汤中的化学成分,结合网络药理学技术通过成分靶点及疾病靶点数据库分别查找成分靶点和疾病靶点,采用Cytoscape软件进行构建网络,对改良桂枝芍药知母汤治疗类风湿性关节炎主要药效成分、核心靶点以及作用机制进行预测。3.机制验证:体内实验采用RT-PCR技术检测大鼠踝关节中巨噬细胞M1（TNF-α,i NOS）,M2（Arg-1,Mrc-1）极化标志物的m RNA水平;采用Western blot技术检测踝关节中NOX2亚基p47与gp91蛋白表达水平,以及NF-κB、JAK-STAT通路关键蛋白p65、stat3磷酸化水平。体外实验检测RAW264.7细胞NOX2膜转位活化情况;采用DHE染色检测细胞ROS的产生;采用Griess试剂检测细胞上清液中NO水平含量。结果:1.药效学研究结果表明,造模后大鼠关节明显肿胀,模型组血清RF,TNF-α,IL-1β,IL-6和IL-10的水平均增加（p＜0.01）,服用改良桂枝芍药知母汤后,高、中、低剂量组关节肿胀情况明显改善（p＜0.01）,且第五周改良桂枝芍药知母汤低、中、高组较阳性药物组效果更好。高、中、低剂量组血清炎症因子水平较模型组均有不同程度的降低（p＜0.01）,其中高剂量组血清炎症因子水平较阳性药物组相当。2.液质联用技术鉴定出改良桂枝芍药知母汤中含有120种成分,通过网络药理学技术预测主要药效成分为Divaricatol、Butyl 4-aminobenzoate、Wogonin、Exoticin、Ferulic acid、Neocnidilide等;推测核心靶点为AKT1、MAPK3、TNF、STAT3等;作用通路可能主要富集在Toll样受体信号通路、MAPK信号通路、NOD样受体信号通路、JAK-STAT信号通路等。3.体内实验研究结果表明改良桂枝芍药知母汤能抑制巨噬细胞的M1极化基因表达水平（p＜0.01）,但不能调控M2基因极化（p＞0.05）,并且能抑制NF-κB以及JAK-STAT通路的活化（p＜0.01）。体外实验结果表明改良桂枝芍药知母汤能抑制胞膜上NOX2的膜转位（p＜0.01）;DHE实验结果及Griess试剂测定结果表明,改良桂枝芍药知母汤能抑制巨噬细胞ROS以及NO的产生（p＜0.01）。结论:1.改良桂枝芍药知母汤治疗类风湿关节炎有较好的疗效,能够改善类风湿性关节炎大鼠关节肿胀、抑制血清炎症因子分泌,具有良好的抗炎效果。2.液质联用结合网络药理学手段可用于预测复方治疗疾病的主要药效成分、核心靶点和主要作用通路。3.改良桂枝芍药知母汤可以通过抑制NOX2以及NF-κB和JAK-STAT通路的活化,调控巨噬细胞极化,对大鼠类风湿性关节炎起到治疗作用。