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目的:探讨邻苯二甲酸二乙基己酯(di-2-ethylhexyl phthalate,DEHP)对小鼠生精细胞(GC-2spd)凋亡的影响及其调控机制。方法:通过体外培养小鼠生精细胞(GC-2spd)细胞,然后用不同浓度的DEHP(0,50,100,200μmol/L)染毒GC-2spd细胞,MTT实验检测细胞存活率,Annexin V–FITC/PI双染色法结合流式细胞仪检测细胞凋亡率,荧光定量PCR法检测凋亡相关基因如Fas L,caspase-3,caspase-8的m RNA表达。Western blot检测Fas L,caspase-3,caspase-8的蛋白表达。分光光度计法测定GC-2spd细胞中丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)活力和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力。结果:随着DEHP浓度的增加,GC-2spd细胞存活率逐渐下降,细胞凋亡率逐渐上升,其中100,200μmol/L剂量组凋亡率与对照组相比差异显著(P<0.05)。MDA的含量总体上升,超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性不同程度的发生改变,其中GSH-PX的活性与对照组比较在50、100μmol/L剂量组降低显著(P<0.05),SOD活性在200μmol/L降低显著(P<0.05)。凋亡相关基因出现过表达或表达不足,Fas L m RNA和蛋白表达均出现上升,其中100、200μmol/L染毒组与对照组差异明显(P<0.05);caspase-8 m RNA表达水平在200μmol/L染毒组上升显著(P<0.05),caspase-8酶原蛋白在100、200μmol/L染毒组表达升高(P<0.05);caspase-3 m RNA在100μmol/L表达升高(P<0.05),酶原蛋白在100、200μmol/L染毒组表达升高(P<0.05)。结论:DEHP可能通过氧化应激和Fas L途径诱导生精细胞凋亡,进而影响精子正常生成,这也可能是DEHP引起雄性生殖功能障碍的内因。