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R-lycosin-I是一种线形、α-螺旋构型的阳离子多肽,由Lycosin-I进行氨基酸替换得到的。而Lycosin-I是从穴居狼蛛毒液中提取分离得到的多肽。R-lycosin-I和Lycosin-I均具有抗癌活性,但其易被蛋白酶水解、稳定性差等不足之处,制约了其进一步的应用。而采用化学修饰方法能有效弥补不足,相对于改变自身结构、PEG修饰、糖基化等方法,脂肪酸修饰不仅可以增加稳定性、提升生物活性,还可以提高多肽药物的脂溶性、膜渗透性。因此,本研究拟通过饱和脂肪酸修饰策略,获得稳定性高、活性强及药效长的抗癌活性肽R-lycosin-I和Lycosin-I的类似物。为提高R-lycosin-I的抗癌活性,采用不同碳链长度的饱和脂肪酸C12-C20,对R-lycosin-I的N-端进行化学修饰,得到五种脂肽(R-C12,R-C14,R-C16,R-C18,R-C20)。采用DLS、TEM及CD分别表征五种脂肽的平均粒径、Zeta电势、形貌、二级结构,并研究其抗癌活性、溶血活性及血清稳定性。DLS结果显示,相对于R-lycosin-I,大部分脂肽的粒径减小,带正电荷。TEM结果显示,五种脂肽呈球形分散,均一性良好。CD结果表明,五种脂肽在PBS缓冲溶液中呈现无规则卷曲结构,而在50%TFE中五种脂肽均为α-螺旋构型,并且R-lycosin-I的螺旋度（35.5%）明显低于常规脂肽的螺旋度（62.99%-100.00%）。细胞毒活性结果表明,在有/无血清条件下,脂肽的抗癌活性均增加。与R-lycosin-I相比,在有血清条件下,R-C16的抗癌活性大约增加四倍,是五种脂肽中细胞毒活性最强的脂肽。溶血活性实验结果表明,R-lycosin-I和五种脂肽的溶血活性随浓度的增加而增强,均显示出剂量依赖性溶血作用。血清稳定性实验结果表明,10%FBS条件下预先处理药物48 h后,脂肽对癌细胞有70%的抑制率,而R-lycosin-I仅有10%的抑制率。SEM和LDH释放实验结果表明,R-C16能够通过轻微裂解细胞膜、诱导凋亡的方式抑制细胞生长。以抗癌活性肽Lycosin-I为研究对象,将十二酸与不同位点的赖氨酸的侧链氨基共价偶联,得到八种脂肽。采用DLS、CD表征八种脂肽的平均粒径、Zeta电势、二级结构。并研究脂肽的抗癌活性、溶血活性及血清稳定性。DLS结果显示,相对Lycosin-I,经十二酸修饰后的八种脂肽的电势增加,粒径减小。CD结果表明,八种脂肽在PBS缓冲溶液中呈无规则卷曲,在50%TFE中为α-螺旋结构。CCK-8活性实验结果表明,八种脂肽的抗癌活性均增加。细胞集落实验结果表明,与Lycosin-I相比,L-C12能有效抑制癌细胞增殖。血清稳定性实验结果表明,10%FBS条件下预处理药物48 h后,L-C12的抗癌活性几乎没有改变,而相同浓度下的Lycosin-I抗癌活性减弱。SEM及LDH释放实验结果表明,L-C12通过与细胞膜相互作用发挥其抗癌活性。总之,采用脂肪酸修饰R-lycosin-I的N-端和Lycosin-I的侧链,能够有效的提高多肽的抗癌活性、血清稳定性等生物活性,为抗癌活性肽的化学修饰研究奠定了基础。